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应用不对称PCR提高PRRSV-CSFV-JEV共检芯片的杂交效率
引用本文:张仙,邓静,常晓霞,杨国淋,马锐,滑翔,赵玉佳,欧阳达,文心田. 应用不对称PCR提高PRRSV-CSFV-JEV共检芯片的杂交效率[J]. 中国人兽共患病杂志, 2016, 0(1). DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.01.011
作者姓名:张仙  邓静  常晓霞  杨国淋  马锐  滑翔  赵玉佳  欧阳达  文心田
作者单位:1. 四川农业大学动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室,雅安 625014;2. 四川华神兽用生物制品有限公司,四川畜科生物制品有限公司,成都 610299;3. 四川农业大学动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室,雅安 625014;四川农业大学人兽共患病研究室与猪病防治研究中心,成都 611130
基金项目:the Special Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest of China(201203056),国家公益性行业(农业)科研专项(201203056)
摘    要:目的比较采用普通RT-PCR和不对称PCR分别进行样品的直接荧光标记,应用于cDNA芯片杂交,分析其对芯片杂交效率的影响。方法以本实验室建立保存的重组质粒和病毒为模板,进行不对称RT-PCR引物浓度优化,应用普通RT-PCR与不对称RT-PCR进行直接荧光标记,将标记的产物与制备的cDNA芯片杂交,在相同条件下完成杂交后芯片的洗涤与扫描,记录扫描图片与数据。结果与普通RT-PCR标记方法相比,应用不对称RT-PCR技术标记单链靶基因,能特异有效提高芯片的杂交效率。结论应用不对称RT-PCR技术对样品进行荧光标记后,与cDNA芯片杂交能提高芯片的杂交效率,有利于cDNA芯片的检测应用。

关 键 词:不对称PCR  cDNA芯片  标记

Enhancing the hybridization efficiency of the PRRSV-CSFV-JEV microarray by asymmetric PCR
Abstract:
Keywords:asymmetric PCR  cDNA microarray  fluorescence labeling
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