巨片形吸虫病快速诊断胶体金免疫层析试条的研制与评价 |
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引用本文: | 周岩,许学年,程娜,刘榆华,孔令颖,姚恺龄,石峰,张建国,Peter Chun. 巨片形吸虫病快速诊断胶体金免疫层析试条的研制与评价[J]. 中国人兽共患病杂志, 2016, 0(2). DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.02.003 |
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作者姓名: | 周岩 许学年 程娜 刘榆华 孔令颖 姚恺龄 石峰 张建国 Peter Chun |
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作者单位: | 1. 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,卫生部寄生虫病病原与媒介生物学重点实验室心,世界卫生组织热带病合作中心,上海 200025;2. 大理州血吸虫病防治研究所,大理,671000;3. 益思美诠生物科技(上海)有限公司,上海,201206;4. 宾川县血吸虫病防治站,宾川,671600 |
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基金项目: | 上海市第四轮三年行动计划项目(GWIV-29) The forth round of Three-Year Public Health Action Plan (2015-2017) |
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摘 要: | 目的建立快速、简便诊断巨片形吸虫病的胶体金免疫层析试条方法。方法提取巨片形吸虫总RNA,通过RT-PCR获得FgCL1-YN基因片段,并克隆入pET28a(+)表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达得到重组蛋白(r FgCL1-YN);将r FgCL1-YN和羊抗鼠IgG抗体分别包被于硝酸纤维素膜的适宜位置作为检测带和质控带,以胶体金标记抗人IgG4抗体的鼠单抗作为检测试剂,制备检测特异性IgG4型抗体的免疫层析试条。用该试条检测巨片形吸虫病患者(30份)、日本血吸虫病患者(15份)以及健康人(32份)血清,评价其诊断价值,同时用ELISA法进行平行检测作为对照。结果试条检测法的敏感性为100%(30/30),特异性为97.9%(46/47),总体符合率为98.7%(76/77)。ELISA法检测的敏感性、特异性和总体符合率分别100%(30/30)、100%(47/47)和100%(77/77)。试条法与ELISA法的敏感性、特异性和总体符合率,经四格表确切概率法检验,P值分别为1、0.5和0.5,全部大于0.05。显示,试条法与ELISA法检测巨片形吸虫病患者血清的结果高度一致。另外,试条法的检测时间为10min,血清用量低于10μL,且具较高的敏感度。结论以r FgCL1-YN建立的快速诊断胶体金免疫层析试条,检测巨片形吸虫病具有较高的诊断价值。
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关 键 词: | 巨片形吸虫病 组织蛋白酶L1 免疫层析试条 ELISA 诊断 |
Establishment and evaluation of colloid gold labeled immuno chromatographic strip test for rapid diagnosis of human fascioliasis gigantica |
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Abstract: | |
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Keywords: | fascioliasis gigantica cathepsin L1 gold-immunochromatographic assay strip ELISA diagnosis |
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