半枝莲总黄酮调控MIIP对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的作用及机制研究

目的 研究半枝莲总黄酮（TF-SB）对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的影响和分子机制。方法 采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测TF-SB（0、25、50、100、200 μg·mL⁻¹）作用24 h对AGS细胞存活率的影响。将AGS细胞分为对照组、溶剂对照（含相同浓度的甲醇）组、TF-SB（100 μg·mL⁻¹）组、质粒空载体（pcDNA，200 nmol·L⁻¹）组、迁移侵袭抑制蛋白（MIIP）过表达质粒（pcDNA-MIIP，200 nmol·L⁻¹）组、TF-SB（100 μg·mL⁻¹）＋小干扰RNA对照（si-con，200 nmol·L⁻¹）组、TF-SB（100 μg·mL⁻¹）＋MIIP小干扰RNA（si-MIIP，200 nmol·L⁻¹）组，转染质粒后TF-SB处理24 h，CCK-8法检测细胞存活率；流式细胞术检测细胞凋亡；Western blotting法检测B细胞淋巴瘤-xl（Bcl-xl）、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（cleaved Caspase-3）、MIIP表达；不同照射量X射线（0、2、4、6、8 Gy）照射后，克隆形成实验检测细胞存活率，并绘制单击多靶模型拟合曲线，Western blotting法检测γ-H2AX蛋白表达。结果 与TF-SB 0 μg·mL⁻¹组比较，TFSB 25、50、100、200 μg·mL⁻¹组AGS细胞存活率显著降低（P＜0.05）；与对照组及溶剂对照组比较，TF-SB 100 μg·mL⁻¹组AGS细胞凋亡率显著升高（P＜0.05），Bcl-xl蛋白表达显著降低（P＜ 0.05），cleaved Caspase-3和MIIP蛋白表达显著升高（P＜0.05）；放疗后，TF-SB组细胞存活率显著降低（P＜0.05），γ-H2AX蛋白表达显著升高（P＜0.05），放疗敏感性增加。与pcDNA组比较，pcDNA-MIIP组AGS细胞凋亡率显著增加，细胞存活率显著降低，Bcl-xl蛋白表达显著降低，cleavedCaspase-3蛋白表达增加（P＜0.05）；放疗后，pcDNA-MIIP组细胞存活率显著降低（P＜0.05），γ-H2AX蛋白表达显著升高（P＜0.05），敏感性增加。与TF-SB＋si-con组比较，TF-SB＋si-MIIP组AGS细胞凋亡率显著降低，细胞存活率显著增加，Bcl-xl蛋白表达显著增加，cleaved Caspase-3蛋白表达显著降低（P＜0.05）；放疗后，TF-SB＋si-MIIP组细胞存活率显著升高（P＜0.05），γ-H2AX蛋白表达显著降低（P＜0.05），敏感性降低。结论 TF-SB通过上调MIIP可抑制AGS细胞增殖，诱导细胞凋亡，提高其放疗敏感性。

Effects of total flavonoids of Scutellaria barbata on proliferation, apoptosis and radiotherapy sensitivity of gastric cancer cell AGS by regulating MIIP