| 高迁移率族蛋白HMGB2的细胞内定位及移位研究 |
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| 引用本文： | 王娟,刘铮,徐佳,张秀娟,伍丽琼,邓鹏,姜勇. 高迁移率族蛋白HMGB2的细胞内定位及移位研究[J]. 解放军医学杂志, 2009, 34(4) |
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| 作者姓名： | 王娟 刘铮 徐佳 张秀娟 伍丽琼 邓鹏 姜勇 |
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| 作者单位： | 广东省蛋白质组学重点实验室、南方医科大学病理生理学教研室,广州,510515 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家自然科学基金委广东省人比政府自然科学联名基金重点项目，教育部长江学者和创新团队发展计划 |
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| 摘 要： | 目的 观察鼠高迁移率族蛋白B2(HMGB2)在真核细胞中的定位和移位情况.方法 提取BALB/c小鼠肝脏组织总RNA,通过RT-PCR扩增得到HMGB2编码序列.然后将该编码序列克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,构建质粒命名为pcDNA3-HA-HMGB2,随后将其转染NIH 3T3细胞.荧光显微镜观察仅转染质粒的细胞和质粒转染与亚砷酸钠刺激30min和1h后细胞内HA-HMGB2融合蛋白的定位及移位情况.结果 重组质粒经酶切、聚合酶链反应(FCR)和测序鉴定证明构建正确,并在NIH 3T3细胞中得到大量表达.荧光显微镜观察发现,FIA-HMGP2蛋白主要分布于细胞核中,经亚砷酸钠刺激后30min,部分细胞中的蛋白从胞核移位到胞质,刺激1h后蛋白则主要分布于胞质中.结论 成功构建带HA标签的HMGB2真核表达载体.该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位、移位,为下一步深入研究HMGB2作用细胞的信号通路提供了一个重要工具.
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| 关 键 词： | 高迁移率族蛋白质类 血凝素类 遗传载体 |
Localization and transposition of mouse high mobility group protein B2 in eukaryotic cells |
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| WANG Juan,LIU Zheng,XU Jia,ZHANG Xiu-juan,WU Li-qiong,DENG Peng,JIANG Yong. Localization and transposition of mouse high mobility group protein B2 in eukaryotic cells[J]. Medical Journal of Chinese People's Liberation Army, 2009, 34(4) |
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| Authors: | WANG Juan LIU Zheng XU Jia ZHANG Xiu-juan WU Li-qiong DENG Peng JIANG Yong |
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