金水六君煎及其拆方含药血清对人中性粒细胞弹性蛋白酶诱导A549细胞黏液高分泌的影响 |
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引用本文: | 柏正平,刘雨,刘芳,谭小宁,谭电波,邓秀娟,李仲普,刘俊,侯公瑾,谭光波.金水六君煎及其拆方含药血清对人中性粒细胞弹性蛋白酶诱导A549细胞黏液高分泌的影响[J].中国中医急症,2019(5):753-756. |
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作者姓名: | 柏正平 刘雨 刘芳 谭小宁 谭电波 邓秀娟 李仲普 刘俊 侯公瑾 谭光波 |
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作者单位: | 湖南中医药大学;湖南省中医药研究院附属医院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(81473564);湖南省研究生科研创新项目(CX2017B423) |
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摘 要: | 目的探讨金水六君煎及其拆方对A549细胞黏液高分泌模型黏蛋白MUC5AC、MUC5B表达的影响。方法制备金水六君煎及其拆方、生理盐水大鼠血清,将人肺腺癌细胞A549分为空白对照组、模型组、金水六君煎组、养阴组、化痰组。采用人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)25 nmol/L诱导A549细胞黏液高分泌,20%空白大鼠血清及含药血清进行干预。CCK8法测定细胞活性,实时荧光定量PCR法(rt-PCR)检测细胞MUC5AC mRNA、MUC5B mRNA表达,Western blotting检测细胞MUC5AC mRNA、MUC5B mRNA表达。结果各组细胞活性无明显差异。与空白组比较,模型组细胞黏蛋白MUC5AC m RNA、MUC5B m RNA与蛋白表达明显增多(P <0.05或P <0.01)。与模型组比较,金水六君煎组及养阴组MUC5AC mRNA、MUC5B m RNA表达明显降低(P <0.05);金水六君煎组及化痰组MUC5AC m RNA、MUC5B m RNA表达明显降低(P <0.01)。结论人中性粒细胞弹性蛋白酶可诱导A549细胞粘蛋白高表达,成功建立黏液高分泌细胞模型。金水六君煎及其拆方含药血清可明显抑制黏蛋白MUC5AC mRNA、MUC5B mRNA与蛋白表达。
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关 键 词: | 金水六君煎 拆方 中性粒细胞弹性蛋白酶 含药血清 A549 黏液高分泌 |
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