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| 自身免疫性疾病抗体检测微阵列制备条件的优化和初步应用 | |
| 引用本文： | 徐华,韩金祥,高雪芹,黄海燕,李钿,潘继红,刘灿兰.自身免疫性疾病抗体检测微阵列制备条件的优化和初步应用[J].中华风湿病学杂志,2006,10(6):349-352,i0003. |
| 作者姓名： | 徐华 韩金祥 高雪芹 黄海燕 李钿 潘继红 刘灿兰 |
| 作者单位： | 1. 250062,济南,山东省医药生物技术研究中心;卫生部生物技术药物重点实验室;山东省现代医用药物与技术重点实验室 2. 山东省立医院风湿免疫实验室 3. 山东省泰安市中心医院感染管理科 |
| 基金项目： | 山东省科技厅重点基金资助项目（003100104） |
| 摘 要： | 目的优化制备蛋白质微阵列的几个关键因素,初步建立自身免疫性疾病抗体检测微阵列,以期用于自身免疫性疾病的诊断。方法选择与制备蛋白质微阵列有关的4个因素,即温育时间、封闭剂、封闭时间和与二抗结合时间,进行正交优化,得出制备蛋白质微阵列的最优化条件,并根据该条件,进一步确定6种自身抗原适合的点样浓度及血清的最佳稀释度。根据优化条件,制备出同时检测6种自身抗体的微阵列,并初步应用,与间接免疫荧光(IIF)法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法加以比较,对结果进行评价。结果制备蛋白质微阵列的最佳优化条件是温育2h,封闭剂采用含有1%小牛血清白蛋白和2．5%蔗糖的PBST,封闭时间为30min,与二抗反应30min,6种自身抗原适合点样浓度从100μg/ml到300μg/ml不等,最佳血清稀释浓度是1∶2。微阵列法对抗核抗体(ANA)的检测与IIF法相比,灵敏度是88．6%,特异度是83．3%,微阵列法对其他5种自身抗体的检测与ELISA法相比,灵敏度在80．0%～88．2%之间,特异度在90．2%～98．6%之间。结论上述优化条件适合于制备自身免疫性疾病抗体检测微阵列,微阵列检测结果与现有常规方法检测结果比较一致,值得推广应用。 |
| 关 键 词： | 蛋白质阵列分析 正交试验 免疫系统疾病 自身抗体 |
| 收稿时间： | 2005-10-09 |
| 修稿时间： | 2005-10-09 |
Preparation conditions optimization and preliminary application of the microarray for detecting autoantibodies |
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| XU Hua,HAN Jin-xiang,GAO Xue-qin,HUANG Hai-yan,LI Tian,PAN Ji-hong,LIU Chan-lan.Preparation conditions optimization and preliminary application of the microarray for detecting autoantibodies[J].Chinese Journal of Rheumatology,2006,10(6):349-352,i0003. | |
| Authors: | XU Hua HAN Jin-xiang GAO Xue-qin HUANG Hai-yan LI Tian PAN Ji-hong LIU Chan-lan |
| Institution: | Shandong Medical and Biotechnology Center, Key Laboratory for Biotech-Drugs, The Ministry of Health. Key Laboratory for Modern Medicine and Technology of Shandong Province, Jinan 250062, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Protein array analysis Orthogonal test Immune system diseases Autoantibodies |
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