| 单疱疹病毒结构蛋白BVP22的亚细胞定位及在细胞间的穿梭 |
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| 引用本文： | 关丽英,汪惠,赖百塘. 单疱疹病毒结构蛋白BVP22的亚细胞定位及在细胞间的穿梭[J]. 中国肺癌杂志, 2006, 9(2): 162-166 |
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| 作者姓名： | 关丽英 汪惠 赖百塘 |
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| 作者单位： | 101149,北京市结核病胸部肿瘤研究所细胞室 |
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| 摘 要： | 背景与目的单疱疹病毒结构蛋白BVP22具有在细胞间穿梭的特性，并能够携带与其融合的蛋白从细胞内合成后穿梭到周围的细胞，克服了基因治疗中转染效率低的问题。本研究的目的是检测BVP22蛋白在细胞中的定位及体内外的穿梭，为将其应用于肺癌的基因治疗提供依据。方法Lipofectamin介导质粒pEYFP和pEYFP-BVP22转染肺癌细胞系801D，G418筛选，建立单克隆细胞系。荧光观察确定BVP22的表达及定位。单克隆细胞系与母系801D以一定比例混合培养，采用流式细胞分选计数、免疫细胞化学染色检测BVP22在细胞间的穿梭。建立裸鼠移植瘤，脂质体包裹质粒注入瘤体检测BVP22在实体瘤中的穿梭。结果成功获得单克隆细胞系pEYFP-801D和pEYFP-BVP22-801D。BVP22在细胞中的定位表现出多相性，多数为胞核定位，少数为胞质丝状定位。流式细胞计数显示，随培养时间延长，YFP阳性细胞的比例无明显增加。免疫细胞化学染色显示pEYFP-BVP22-801D与801D混合培养24h后，几乎所有细胞的胞核都染成了棕黄色；裸鼠移植瘤的免疫组化染色显示注射pEYFP-BVP22的肿瘤组织大部分被染成棕黄色。结论BVP22主要定位于细胞核中，其胞核定位可能与细胞分裂及其在细胞间穿梭相关。在体内外BVP22均能够介导与其融合的蛋白在细胞间发生穿梭。
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| 关 键 词： | 单克隆细胞系 细胞定位 细胞间穿梭 |
| 收稿时间： | 2005-03-29 |
| 修稿时间： | 2005-06-30 |
Cellular localization and intercellular trafficking of bovine herpersvirus structural protein BVP22 |
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| GUAN Liying,WANG Hui,LAI Baitang. Cellular localization and intercellular trafficking of bovine herpersvirus structural protein BVP22[J]. Chinese journal of lung cancer, 2006, 9(2): 162-166 |
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| Authors: | GUAN Liying WANG Hui LAI Baitang |
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| Affiliation: | Cell Department, Beijing Tuberculosis and Thoracic Tumor Research Institute, Beijing 101149, P. R. China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | BVP22 |
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