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hBMP—4瞬时转染对家兔骨髓基质干细胞生物学行为的影响
引用本文:蒋欣泉,张志愿,等.hBMP—4瞬时转染对家兔骨髓基质干细胞生物学行为的影响[J].中国医学科学院学报,2003,25(1):13-16,T002.
作者姓名:蒋欣泉  张志愿
摘    要:目的:应用兔骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,MSCs)作为基因治疗的靶细胞,体外转染人骨形成蛋白4(human bone morphogentic protein-4,hBMP-4)基因,观察瞬时转染对兔MSCs生物学行为的影响。方法:贴壁法培养兔MSCs,分别在体外转染pEGFP-hBMP-4和pEGFP基因并留置空白对照。检测转染效率及目的基因的转录和表达,观察细胞形态及生长情况,检测碱性磷酸酶、钙结节及骨钙素等成骨细胞表型。结果:基因转染效率达到20%-30%,RT-PCR显示MSCs本身有目的基因的少量转录,转染pEGFP-hBMP-4后转录增强。目的基因转染后细胞形态略有变化,生长曲线与对照组相似,碱性磷酸酶阳性染色面积增加(P=0.0016),钙结节增多(P=0.0001),骨钙素表达增强(P=0.03)。结论:优化的条件下取得了较高的转染效率,hBMP-4基因转染可以增强目的基因的转录,加速MSCs向成骨细胞表型转化。HBMP-4转染的MSCs可望成为组织工程化骨理想的种子细胞。

关 键 词:组织工程  骨髓基质干细胞  基因治疗  骨形成蛋白
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