多酶恒温核酸快速扩增法检测大肠杆菌O157∶H7

【目的】采用多酶恒温核酸快速扩增(MIRA)荧光法，结合金属有机骨架免疫磁珠富集功能，开发大肠杆菌O157∶H7快速富集和检测方法。【方法】以rfbE基因为靶标，筛选引物、探针及优化反应体系，同时考察该方法的特异性、灵敏度和实际应用情况。【结果】检测大肠杆菌O157∶H7菌体的检测限为1.18×10⁵CFU·m^-1，菌体DNA质量浓度检测限为9 pg·μL^-1，检测过程可在20 min内完成。47株菌(24株目标菌和23株非目标菌)特异性验证结果与实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法一致。【结论】该研究开发了一种基于金属有机骨架免疫磁珠富集结合MIRA的检测方法，该法操作简单、反应迅速，适用于食品中大肠杆菌O157∶H7的快速富集和检测。