| Restin基因启动子的克隆及其在HeLa细胞中的转录活性 |
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| 引用本文： | 王瑞华,傅海燕,杨国栋,路凡,赵忠良.Restin基因启动子的克隆及其在HeLa细胞中的转录活性[J].第四军医大学学报,2006,27(1):46-48. |
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| 作者姓名： | 王瑞华 傅海燕 杨国栋 路凡 赵忠良 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,国家肿瘤生物学重点实验室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,国家肿瘤生物学重点实验室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,国家肿瘤生物学重点实验室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,国家肿瘤生物学重点实验室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,国家肿瘤生物学重点实验室,陕西,西安,710033 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30271457,30470874） |
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| 摘 要： | 目的：扩增细胞静息因子（restin）基因启动子并构建该启动子的荧光报告系统，探讨其对全反式维甲酸（alltrans retinoic acid，ATRA）刺激的反应．方法：①对restin基因上游约2000bp基因组序列进行计算机生物信息学分析．②利用PCR技术扩增restin基因上游序列，将其克隆入pG5-luc中，插入荧光素酶报告基因上游，取代5个GAL-4结合位点及腺病毒启动子，构建Rp—luc质粒．③将构建的质粒转染入HeLa细胞，ATRA诱导检测该质粒中荧光素酶的表达．结果：酶切及测序结果均证实成功克隆了restin基因上游序列，已将该序列插入到荧光素酶基因的上游；ATRA诱导转入HeLa细胞中的真核表达载体Rp—luc，荧光素酶表达明显增加．结论：成功构建了含有restin基因启动子序列的荧光报告系统，为进一步研究restin基因功能及其转录调控奠定了基础．
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| 关 键 词： | restin 转录调控 启动子 全反式维甲酸 |
| 文章编号： | 1000-2790(2006)01-0046-03 |
| 收稿时间： | 2005-06-30 |
| 修稿时间： | 2005-08-23 |
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