基于AMPK/ULK1自噬通路探讨人参败毒散对溃疡性结肠炎黏膜屏障的干预机制

目的 研究人参败毒散调控腺苷酸活化蛋白激酶/Unc-51样激酶1（AMPK/ULK1）自噬通路抑制溃疡性结肠炎小鼠黏膜屏障损伤的作用机制。方法 将60只SD大鼠随机分为6组，分为正常组，模型组，柳氮磺胺吡啶肠溶片组（西药组），人参败毒散高、中、低剂量组。通过2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）/50%乙醇诱导UC模型，西药组（0.3125 g·kg^-1）、人参败毒散高、中、低剂量组（31.2、15.6、7.8 g·kg^-1）灌胃2周后，检测结肠组织病理学改变；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测腺苷酸活化蛋白（AMPKα）mRNA表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测紧密连接蛋白中闭合蛋白（Occludin）、紧密连接蛋白蛋白-2（Claudin-2）、自噬标志蛋白p62、微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）及AMPK/ULK1通路磷酸化蛋白p-AMPK、p-ULK1的表达水平。结果 与正常组比较，模型组结肠损伤评分明显上调（P<0.05），AMPKα mRNA表达明显下调（P<0.05），p-AMPK、p-ULK1、Occludin蛋白水平及LC3Ⅱ/Ⅰ明显下调（P<0.05），而p62、Claudin-2蛋白水平明显上调（P<0.05）；与模型组比较，人参败毒散高、中、低剂量组的结肠损伤评分下降，AMPKα mRNA明显上调，p-AMPK、p-ULK1、Occludin蛋白水平及LC3Ⅱ/Ⅰ上升，而p62、Claudin-2蛋白表达下降，以人参败毒散中剂量组干预效应最明显（P<0.05）。结论 人参败毒散可抗肠道黏膜屏障损伤，以人参败毒散中剂量组疗效最佳，其机制可能与激活AMPK/ULK1自噬通路有关，通过加速LC3Ⅰ向LC3Ⅱ转化，促进p62降解，从而改善紧密连接蛋白Occludin、Claudin-2功能，修复肠道机械屏障损伤。

Renshen Baidusan Protects Mucosal Barrier in Ulcerative Colitis via AMPK/ULK1 Autophagy Pathway