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钽涂层对骨髓间充质干细胞的黏附增殖及成骨分化的影响
引用本文:尉晓蔚,赵德伟,刘阁,豆晓杰,赵振华,傅维民,刘天柱.钽涂层对骨髓间充质干细胞的黏附增殖及成骨分化的影响[J].中华创伤骨科杂志,2020(5):438-444.
作者姓名:尉晓蔚  赵德伟  刘阁  豆晓杰  赵振华  傅维民  刘天柱
作者单位:大连大学附属中山医院骨科实验室;湖州市第一人民医院骨三科
基金项目:国家自然科学基金(81601885&81371942);大连市科技局高层次人才创新支持计划项目(2017RQ153);大连市科技创新基金(2018J11CY030);辽宁省博士启动基金指导计划项目(20170520015)。
摘    要:目的探讨钽涂层金属在体外促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附、增殖及成骨分化方面的作用。方法在体外取6只6周龄SD大鼠BMSCs进行原代培养至第3代,使用化学气相沉积系统自行制备钽涂层金属。然后进行流式细胞术鉴定、BMSCs三向诱导、荧光染色、细胞增殖检测及实时荧光定量聚合酶链反应技术(Q-PCR)试验。观察比较BMSCs在钛合金圆片(Ti6Al4V组)和钽金属圆片(Ta组)表面黏附的BMSCs数量、增殖速率、成骨细胞特异性转录因子(OSX)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨粘连蛋白(OSN)和骨桥蛋白(OPN)的表达情况。结果流式细胞术结果显示CD44(94.55%)、CD90(95.01%)、CD34(0.06%)。诱导成骨分化14 d后碱性磷酸酶(ALP)染色阳性;诱导成骨分化21 d后出现茜素红钙化结节;成脂诱导21 d后油红O染色呈阳性;成软骨诱导21 d后阿利新蓝染色评估有软骨形成能力。激光共聚焦显微镜结果显示BMSCs在Ti6Al4V组和Ta组金属圆片表面贴附生长,细胞间互相接触、聚集成片,Ta组金属圆片上黏附的BMSCs数量明显多于Ti6Al4V组,并且具有更好的延展性能。细胞增殖检测结果发现,分别共培养1、3、5、7 d后Ta组BMSCs的增殖速率明显快于Ti6Al4V组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Q-PCR结果发现,与Ti6Al4V组相比,体外培养7 d后Ta组金属圆片更能促进OSN和OPN的表达,差异有统计学意义(P<0.05);体外共培养21 d后,Ta组金属圆片更能促进OSX、RUNX2、OSN和OPN的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论相比于传统的骨科植入物钛合金而言,钽涂层金属能够更好地促进BMSCs的黏附,增殖和成骨分化。

关 键 词:间充质干细胞      生物相容性材料  成骨诱导

Effect of tantalum coating on adhesion,proliferation and osteogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells
Wei Xiaowei,Zhao Dewei,Liu Ge,Dou Xiaojie,Zhao Zhenhua,Fu Weimin,Liu Tianzhu.Effect of tantalum coating on adhesion,proliferation and osteogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells[J].Chinese Journal of Orthopaedic Trauma,2020(5):438-444.
Authors:Wei Xiaowei  Zhao Dewei  Liu Ge  Dou Xiaojie  Zhao Zhenhua  Fu Weimin  Liu Tianzhu
Institution:(Orthopaedic Laboratory,Zhongshan Hospital Affiliated to Dalian University,Dalian 116001,China;Department of Othopaedics,The First People's Hospital of Huzhou,Huzhou 313000,China)
Abstract:
Keywords:Mesenchymal stem cells  Tantalum  Titanium  Biocompatible materials  Osteogenic differentiation
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