苦参碱联合DMSO大规模冻存人胎肝细胞的实验研究 |
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引用本文: | 龚独辉,潘明新,姚坤厚,夏武政,康玉占,汪艳,高毅.苦参碱联合DMSO大规模冻存人胎肝细胞的实验研究[J].广东医学,2009,30(4). |
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作者姓名: | 龚独辉 潘明新 姚坤厚 夏武政 康玉占 汪艳 高毅 |
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作者单位: | 南方医科大学珠江医院肝胆外科,广州,510282 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划),广州市科技计划 |
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摘 要: | 目的 应用苦参碱联合DMSO大规模冻存人胎肝细胞,观察苦参碱对大规模低温冻存人胎肝细胞功能的影响。方法 改良肝细胞获取方法分离人胎肝细胞,经过1h预培养后。将5种不同浓度(1×107,2.5×107,5×107,7.5×107,10×107)的胎肝细胞以6mg/L苦参碱+5%DMSO冻存保护液置于骨髓干细胞冻存袋在液氮中冷冻保存1个月。1个月后复苏,进行活率、形态学及功能检测。结果 五种不同浓度的细胞冻存一月后,细胞浓度为2.5×107/ml组复苏后存活率与其余四组相比差异有统计学意义(P<0.05)且明显高于其余四组。复苏后细胞存活率和24h贴壁率分别为73%、69%,经过短期培养后,细胞功能逐渐恢复。结论 (1苦参碱对低温冻存之人胎肝细胞有保护作用,与二甲基亚砜联合使用可降低后者的浓度;(2)以5%DMSO+6mg/L苦参碱作为冻存保护剂,细胞浓度在2.5×107冻存效果最佳。该大规模冻存方法基本上可以满足生物人工肝肝细胞应用的需求。
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关 键 词: | 生物人工肝 人胎肝细胞 冷冻保存 苦参碱 |
The experimental study of matrine combination with DMSO's effect on the large-scale cryopreservation of fetal hepatocytes |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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