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| C57/BL6小鼠骨髓间充质干细胞分离培养方法的改良和鉴定 | |
| 引用本文： | 夏宇,盛瑾,朱铠,过常发,王春生.C57/BL6小鼠骨髓间充质干细胞分离培养方法的改良和鉴定[J].贵州医药,2012,36(9):779-782. |
| 作者姓名： | 夏宇 盛瑾 朱铠 过常发 王春生 |
| 作者单位： | 1. 遵义医学院附属医院胸心血管外科,563003 2. 遵义医学院附属医院心血管内科,563003 3. 上海复旦大学中山医院心血管外科,200032 |
| 摘 要： | 目的 建立一种体外纯化及培养扩增C57/BL6小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的简单有效方法.方法 利用骨髓MSCs在体外培养皿中培养时具有贴壁生长的特性,采用全骨髓法分离培养C57/BL6小鼠MSCs,通过体外培养和连续传代达到纯化和扩增MSCs目的,并与以优化.倒置显微镜下观察细胞形态变化情况；利用四唑盐比色(MTT)法测定MSCs的生长曲线；流式细胞仪(FCM)鉴定MSCs膜抗原.结果 C57/BL6小鼠胫骨全骨髓细胞在分离后与含15％优质胎牛血清DMEM/F12培养基混合,约5～10 min后即可见大量有核细胞贴壁,细胞形态为圆形,24～48 h后可见贴壁细胞转变为椭圆形、多角形及短梭形,7～12 d时细胞呈长梭形并达到90％单层融合.通过传代细胞进一步纯化及扩增.细胞传代后2d内处于潜伏期,3d后进入生长期,5d后进入平台期.第4代MSCs进行FCM检测CD45、CD44、CD29和CD54阳性率分别为2.4％、83.2％、95.1％和94.1％.激光免疫共聚焦结果显示造血细胞表面标物CD34和CD45阴性,而CD44和CD105阳性.结论 C57/BL6小鼠全骨髓贴壁法能有效得到分离纯化的MSCs,用此方法培养的C57/BL6小鼠MSCs生长稳定,增殖能力活跃,具有MSCs的一般生物学特性,可以为组织工程提供理想的种子细胞. |
| 关 键 词： | 间充质干细胞 骨髓 贴壁法分离培养 |
The biological characteristics of C57/BL6 mice bone marrow-derived mesenchymal stem cells isolated and cultured with attachment method |
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| Xia Yu , Shen Jin , Zhu Kai , Guo Changfa , Wang Chunsheng.The biological characteristics of C57/BL6 mice bone marrow-derived mesenchymal stem cells isolated and cultured with attachment method[J].Guizhou Medical Journal,2012,36(9):779-782. | |
| Authors: | Xia Yu Shen Jin Zhu Kai Guo Changfa Wang Chunsheng |
| Institution: | .Department of Check and Cardiac Surgery,The Affiliated Hospital of Zunyi Medical College,Zunyi 563003,China.*Department of Cardiac Internal Medicin,The Affiliated Hospital of Zunyi Medical College,Zunyi 563003,China.**Department of Cardiac Surgery,Zhongshan Hospital of Shanghai Fudan University,Shanghai 200032,China. |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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