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HRE增强hTERT启动子-tk/GCV基因系统对缺氧环境肿瘤细胞的杀伤作用
引用本文:胡薇,艾永兴,郑梅竹,张玉静.HRE增强hTERT启动子-tk/GCV基因系统对缺氧环境肿瘤细胞的杀伤作用[J].吉林大学学报(医学版),2010,36(1):14-19.
作者姓名:胡薇  艾永兴  郑梅竹  张玉静
作者单位:吉林农业大学生命科学学院生物化学教研室,吉林长春,130118;吉林大学人兽共患病研究所,吉林长春,130062;吉林大学人兽共患病研究所,吉林长春,130062
基金项目:国家自然科学基金资助课题(30471284);;吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目资助课题(吉科合字[2008]第73号);;吉林农业大学科学研究启动基金资助课题(200705)
摘    要:目的:探讨缺氧反应元件(HRE)增强hTERT启动子-tk/GCV逆转录病毒基因系统对缺氧环境肿瘤细胞的体外杀伤作用。 方法:构建由HRE缺氧反应元件修饰的hTERT杂合启动子和hTERT单一启动子引导单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因表达的重组逆转录病毒载体,在脂质体介导下分别转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆。将重组病毒感染人肺癌细胞SPC-A1和人肝癌细胞Bel-7402,G418筛选出抗性克隆肿瘤细胞。实验分为对照组、SPC-A1/tk组和Bel-7402/tk组。在缺氧处理条件下,MTT法检测前体药物丙氧鸟苷(GCV)对SPC-A1/tk和Bel-7402/tk细胞的杀伤效应,流式细胞仪检测其细胞凋亡率和细胞周期的变化。 结果:与对照组比较,缺氧环境培养的SPC-A1/tk和Bel-7402/tk细胞对GCV的敏感性明显增强,其中细胞凋亡率明显升高(P<0.001),细胞周期各期细胞数有所减少(P<0.05)。与hTERT启动子引导的tk基因系统组细胞比较,[HRE]hTERT杂合启动子引导的tk基因系统组肿瘤细胞存活率更低(P<0.01),诱导肿瘤细胞凋亡率明显升高(P<0.01),G1期和G0期细胞数有所增高(P<0.05),S期细胞数减少(P<0.05)。结论:HRE能增强hTERT启动子-tk/GCV自杀基因系统对缺氧环境中肿瘤细胞的体外杀伤作用。

关 键 词:肿瘤  hTERT启动子  缺氧反应元件  HSV-tk基因  缺氧
收稿时间:2009-08-16

Enhancement of HRE on killing effect of hTERT promoter-tk/GCV suicide gene therapy system on tumor cells under hypoxic condition
HU Wei,AI Yong-xing,ZHENG Mei-zhu,ZHANG Yu-jing.Enhancement of HRE on killing effect of hTERT promoter-tk/GCV suicide gene therapy system on tumor cells under hypoxic condition[J].Journal of Jilin University: Med Ed,2010,36(1):14-19.
Authors:HU Wei  AI Yong-xing  ZHENG Mei-zhu  ZHANG Yu-jing
Institution:(1. Department of |Biochemistry,College of Life Science,Jilin Agriculture University,Changchun 130118|China|2. Institute of Zoonosis,Jilin University,Changchun 130062|China)
Abstract:
Keywords:neoplasms  hTERT promoter  hypoxia responsive element  HSV-tk gene  Anoxia  
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