| 摘 要： | 目的探讨不同组分人参糖蛋白对β-淀粉样蛋白25~35(Aβ25~35)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法采用超滤、透析等方法分离得到人参糖蛋白P1,采用葡聚糖凝胶对P1分离纯化得到P2和P3。采用苯酚-硫酸法测定3个组分中性糖含量,间羟基联苯法测定中酸性糖含量,Lowry法测定蛋白含量,高效液相色谱法测定纯度和分子量分布。采用MTT法考察人参糖蛋白对细胞损伤的保护作用。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测人参糖蛋白对细胞凋亡的影响。结果 P1中性糖含量为25.95%,酸性糖含量6.80%,蛋白含量为71.25%,重均分子量分布在700~45 000 D。P2中性糖含量为13.25%,酸性糖含量10.45%,蛋白含量为63.65%,重均分子量分布在4 500~20 000 D。P3蛋白含量为88.18%,重均分子量分布在5 000 D。组成糖和氨基酸分析结果:人参糖蛋白主要由甘露糖、岩藻糖、半乳糖醛酸、半乳糖、葡萄糖及N-乙酰葡萄糖(或N-乙酰半乳糖)以及17种氨基酸。人参糖蛋白对Aβ25~35诱导的细胞凋亡均有抑制作用,其中P1作用最强,当浓度为2.5μg/ml时即表现出显著抑制细胞凋亡活性(P0.05)。结论人参糖蛋白对Aβ25~35诱导SH-SY5Y细胞凋亡具有抑制作用,可有效保护神经细胞。
|
