| 摘 要： | 目的探讨PNU激活星形胶质细胞α7胆碱能受体(α7 n AChRs)上调内源性B-晶状体蛋白(Cryab)并抑制β淀粉样蛋白(Aβ)集聚的现象及其机制。方法分离24 h内新生乳鼠大脑皮质培养原代星形胶质细胞并鉴定;体外制备Aβ_(1~42)寡聚体;将细胞分为对照组、PNU组、PNU+α7 n AChRs阻断剂(MLA)组、Aβ_(1~42)组、PNU+Aβ_(1~42)组、PI3K信号通路阻断剂LY294002+PNU+Aβ_(1~42)组。用蛋白印迹法检测细胞内Cryab、P-Akt(ser473)、Aβ寡聚体的表达水平。结果 (1)PNU可以显著上调星形胶质细胞内源性Cryab蛋白(P0.05);应用MLA阻断α7 n AChRs后,PNU上调内源性Cryab蛋白的作用被显著抑制(P0.05);使用LY294002阻断PI3K信号通路后,PNU上调内源性Cryab蛋白的作用被显著抑制(P0.01);(2)PNU能够显著上调磷酸化Akt蛋白水平(P0.05);应用MLA阻断α7 n AChRs后,PNU上调磷酸化Akt蛋白的作用被显著抑制(P0.01);使用LY294002阻断PI3K信号通路后,PNU上调磷酸化Akt蛋白的作用被显著抑制(P0.01);(3)在细胞裂解液及培养基中,PNU显著增强星形胶质细胞对Aβ聚集的抑制作用(P0.01);使用LY294002阻断PI3K信号通路后,PNU增强星形胶质细胞抑制Aβ聚集的功能显著减弱(P0.01)。结论PNU通过激活星形胶质细胞α7 n AChRs上调内源性Cryab从而抑制Aβ集聚;PI3K/Akt信号通路可能参与PNU激活星形胶质细胞α7 n AChRs上调内源性Cryab蛋白抑制Aβ集聚的过程。
|
