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SARS冠状病毒S蛋白部分序列2的克隆与表达
引用本文:秦莉,吴少庭,王西明,袁仕善,雷明军,潘辉榕,黄达娜,高世同,张仁利,屈伸.SARS冠状病毒S蛋白部分序列2的克隆与表达[J].中国人兽共患病杂志,2003,19(5):17-19,136.
作者姓名:秦莉  吴少庭  王西明  袁仕善  雷明军  潘辉榕  黄达娜  高世同  张仁利  屈伸
作者单位:[1]深圳市疾病预防控制中心,深圳518020 [2]华中科技大学同济医学院
摘    要:目的 构建SARS冠状病毒棘突蛋白部分序列2(S2)的原核表达质粒,分析其在大肠杆菌中的表达状况。方法 采用逆转录聚合酶链式反应技术从SARS冠状病毒基因组中扩增出编码S蛋白的第2170到2814位碱基的基因片段,克隆至pMD18-T载体,PCR筛选阳性克隆并测序。用限制性内切酶消化后,目的片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌.JM109,PCR和双酶切鉴定转化菌落。将阳性菌落经IPTG诱导,SDS—PAGE和免疫印迹分析靶蛋白的表达。结果 RT—PCR扩增出S2特异片段,经测序与GenBank比对存在1处碱基突变。S2基因片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-2构建成重组表达质粒,并在JM109中表达了S2融合蛋白。结论 成功构建了SARS冠状病毒S2的重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达了S2融合蛋白。

关 键 词:SARS  严重急性呼吸综合征  冠状病毒  S2蛋白  基因克隆  基因表达
文章编号:1002-2694(2003)05-0017-04

Cloning and expression of SARS Coronavirus spike protein fragment 2
QIN Li,WU Shaoting,WANG Ximing,et al..Cloning and expression of SARS Coronavirus spike protein fragment 2[J].Chinese Journal of Zoonoses,2003,19(5):17-19,136.
Authors:QIN Li  WU Shaoting  WANG Ximing  
Institution:QIN Li2,WU Shaoting1,WANG Ximing2,et al.
Abstract:
Keywords:SARS  Coronavirus  spike protein  clone  expression  
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