| 人高迁移率族蛋白组A1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 金志良,孙新臣,成红艳,魏青,何少忠. 人高迁移率族蛋白组A1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定[J]. 医学研究生学报, 2008, 21(5): 468-472 |
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| 作者姓名： | 金志良 孙新臣 成红艳 魏青 何少忠 |
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| 作者单位： | 1. 东南大学附属中大医院肿瘤科,江苏南京,210009
2. 江苏省肿瘤医院放疗科,江苏南京,210009 |
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| 基金项目： | 江苏省南京市医学发展基金 , 江苏省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建和鉴定人高迁移率族蛋白组A1(HMGA1)基因RNA干扰慢病毒表达载体。方法:针对已经筛选确定的HMGA1基因RNA干扰有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ酶切后的pGCL-GFP载体(含U6启动子和绿色荧光蛋白)连接产生LV-sh HMGA1慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。用LV-sh HMGA1慢病毒载体、pHelper 1.0和pHelper 2.0等3种质粒共转染包装293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度。结果:PCR和测序证实,成功构建LV-shHMGA1的慢病毒载体,病毒滴度达5×107TU/ml。结论:人HMGA1基因RNA干扰慢病毒载体的成功构建为进一步应用RNAi技术研究HMGA1基因的功能打下了基础。
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| 关 键 词： | RNA干扰 高迁移率族蛋白组A1 慢病毒 |
| 文章编号： | 1008-8199(2008)05-0468-04 |
| 修稿时间： | 2007-10-19 |
Construction and identification of a Ientivirai vector harboring RNAi sequence targeting the human high mobility group A1 gene |
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| JIN Zhi-liang,SUN Xin-chen,CHENG Hong-yan,WEI Qing,HE Shao-zhong. Construction and identification of a Ientivirai vector harboring RNAi sequence targeting the human high mobility group A1 gene[J]. Bulletin of Medical Postgraduate, 2008, 21(5): 468-472 |
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| Authors: | JIN Zhi-liang SUN Xin-chen CHENG Hong-yan WEI Qing HE Shao-zhong |
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| Keywords: | RNA interference HMGA1 Lentivirus |
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