串联质谱技术检测孕妇胆汁酸谱的性能评估及其参考区间建立

目的对基于串联质谱(LC-MS/MS)技术检测胆汁酸谱的方法进行性能评估并建立适合于南京地区孕妇的15种胆汁酸亚型参考区间。方法采用LC-MS/MS技术检测孕中期孕妇血清15种胆汁酸亚型,根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)C62-A和美国食品药品监督管理局的生物分析方法验证标准,从定量检出限、准确度、精密度、线性、携带污染率等几个方面进行性能评估;根据CLSI EP28-A3c推荐的方法和程序建立南京地区孕妇孕中期15种胆汁酸亚型的参考区间,用小样本验证法对新建立的20例样本参考区间进行验证。结果 LC-MS/MS技术可同时检测孕妇血清中15种胆汁酸亚组分,最低定量限为标准曲线最低浓度点(S1)浓度,最低检出限为1/4 S1;线性:各种亚型均呈现良好的线性关系,r~2均大于0.99;准确度:各种亚型加标回收试验回收率均为80%～120%,偏倚15%;批内精密度和批间精密度变异系数均小于15%;携带污染率:小于最低定量限的25%;孕中期孕妇参考区间:以石胆酸为例,新的参考区间为0.07～13.46 ng/mL,95%的验证结果落于新的参考区间内。结论 LC-MC/MS技术可以精准、快速地检测胆汁酸谱15种亚型,评估结果符合各项性能验证要求;新建立的胆汁酸谱15种亚型的参考区间适合于南京地区孕中期孕妇。