| 人CD40分子基因转染人脐静脉内皮细胞ECV-304 |
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| 引用本文： | 王维蓉,林蓉,杨玉琮,甘伟杰,刘俊田,吕社民. 人CD40分子基因转染人脐静脉内皮细胞ECV-304[J]. 南方医科大学学报, 2005, 25(12): 1474-1477 |
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| 作者姓名： | 王维蓉 林蓉 杨玉琮 甘伟杰 刘俊田 吕社民 |
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| 作者单位： | 西安交通大学医学院药理教研室,陕西,西安,710061;西安交通大学医学院第一医院实验医学中心,陕西,西安,710061;西安交通大学医学院生物化学教研室,陕西,西安,710061 |
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| 摘 要： | 目的构建人CD40的真核表达载体,建立持续﹑稳定高表达CD40的人脐静脉内皮细胞ECV-304。方法将含有CD40的克隆载体pUCD40酶切后,再克隆到真核表达载体pCDNA3.1中,构建重组质粒pCDNA3.1( )/CD40,并对重组质粒进行酶切鉴定。然后用脂质体法将重组质粒转染ECV-304,G418筛选转染的细胞。RT-PCR﹑Western-blotting和流式细胞仪定性定量检测转染后的ECV-304的CD40的表达情况。结果经酶切鉴定,重组体中已插入目的基因片段CD40。RT-PCR和Western-blotting证实,重组质粒转染的ECV-304中有CD40基因的表达,流式细胞仪检测转染后的ECV-304的CD40的表达率为95%。结论成功构建了真核表达载体pCDNA3.1( )/CD40,并建立了高表达CD40的ECV-304,为筛选抗动脉粥样硬化药物奠定了基础。
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| 关 键 词： | CD40 人脐静脉内皮细胞 转染 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-2588(2005)12-1474-04 |
| 修稿时间： | 2005-05-16 |
Liposome-mediated human CD40 gene transfection and human umbilical vein endothelial ECV-304 cells |
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| WANG Wei-rong,LIN Rong,YANG Yu-cong,GAN Wei-jie,LIU Jun-tian,L She-min. Liposome-mediated human CD40 gene transfection and human umbilical vein endothelial ECV-304 cells[J]. Journal of Southern Medical University, 2005, 25(12): 1474-1477 |
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| Authors: | WANG Wei-rong LIN Rong YANG Yu-cong GAN Wei-jie LIU Jun-tian L She-min |
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| Affiliation: | WANG Wei-rong,LIN Rong,YANG Yu-cong,GAN Wei-jie,LIU Jun-tian,L(U) She-min |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CD40 |
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