CCL28-CCR10通路在类风湿关节炎单核细胞迁移中的作用

目的观察类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)患者关节中单核/巨噬细胞趋化因子受体CCR10的表达，探讨趋化因子CCL28与其受体CCR10在RA单核细胞迁移中的作用及机制。方法采用免疫组织化学法分析8例RA患者、4例骨关节炎(osteoarthritis，OA)患者和4例正常对照者滑膜组织中CCR10的表达并进行细胞染色评分(0~5分)，流式细胞术检测26例RA患者和20例健康对照者外周血、15例RA患者滑液CD14⁺单核细胞中CCR10阳性细胞比例，Transwell迁移实验检测CCL28对RA和健康对照单核细胞的趋化性，Western blotting检测CCL28干预RA单核细胞的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)、蛋白激酶B(protein kinase B，Akt)通路磷酸化。结果CCR10表达在RA滑膜衬里层细胞及衬里下层的巨噬细胞、血管内皮细胞、淋巴细胞；RA滑膜衬里层细胞和衬里下层巨噬细胞的CCR10表达明显高于OA和正常对照的滑膜(P均 < 0.01)。RA患者外周血CD14⁺单核细胞表达CCR10明显高于健康对照者[(15.6±3.0)% vs. (7.7±3.8)%, P < 0.01]；RA患者滑液单核细胞CCR10的表达为(32.0±15.0)%，明显高于RA外周血(P < 0.01)。体外实验中，10~100 μg/L的CCL28能有效诱导RA和健康对照外周血CD14⁺单核细胞迁移(P均 < 0.01)；抗CCR10单抗能明显抑制CCL28对RA单核细胞的趋化(P < 0.01)。CCL28干预RA单核细胞明显增加ERK和Akt的磷酸化(P均 < 0.05)；ERK抑制剂(U0126)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)抑制剂(LY294002)可明显降低CCL28诱导的RA单核细胞迁移(P均 < 0.01)。结论RA患者外周血、滑液及滑膜单核/巨噬细胞CCR10表达增高，CCL28与CCR10结合并通过激活ERK、PI3K/Akt信号通路促使RA单核细胞迁移；CCL28-CCR10通路可能参与招募单核细胞进入RA关节，从而促进滑膜炎症和骨破坏。