骨髓基质细胞的培养和保存方法

目的：建立大量生产骨髓基质细胞的培养和保存方法。为组织工程骨的培养提供种子细胞。方法：从4～5月龄新西兰大白兔胫骨上端髓腔抽吸骨髓，接种、培养及液氮冻存。通过显微镜观察其生物学表现，测定碱性磷酸酶，鉴定其生物学特征。结果：在培养过程中，未分化的骨髓基质细胞选择性粘贴于培养皿底，形态为成纤维细胞样，并呈集落生长。培养值至9-10天时，贴壁细胞单层融合。传代后的细胞形成集落的趋势明显下降，但细胞形态仍表现为成纤维细胞样，复苏细胞贴壁时间延迟，但增殖速度和形成没有改变。可测出碱性磷酸酶活性。结论：成功地建立了骨髓基质细胞的培养和冻存方法。