抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定 |
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引用本文: | 陆春雪,彭波,陈超群,周洲,彭江南,钟光明,吴移谋.抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定[J].中国免疫学杂志,2014(1):80-84. |
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作者姓名: | 陆春雪 彭波 陈超群 周洲 彭江南 钟光明 吴移谋 |
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作者单位: | 南华大学医学院病原生物学研究所;南华大学医学院肿瘤研究所 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(No.81202374);湖南省自然科学基金(No.12JJ3113);湖南省高校科技创新团队(湘教通[2010]212号)等基金资助 |
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摘 要: | 目的:制备小鼠抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体并鉴定其生物学特性。方法:重组MIP蛋白免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,间接ELISA法筛选阳性克隆并进行有限稀释克隆化,建立分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步采用ELISA法鉴定单克隆抗体的效价、类别及抗MIP蛋白特异性,IFA法鉴定单克隆抗体的衣原体种属特异性及中和能力。结果:建立了2株能稳定分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1R6H6、2L9D2),ELISA法测得培养上清效价均为1:1 600,免疫球蛋白类型分别为IgG2a和IgG1;2株单克隆抗体不仅能特异性的识别MIP重组蛋白,而且能特异性识别沙眼衣原体血清型A、D、L2所编码的内源性MIP蛋白,但不识别其他衣原体优势蛋白及MoPn、AR39和6BC;体外中和试验表明,2株单克隆抗体均能有效中和衣原体的感染性。结论:获得了有活性的能特异性识别MIP蛋白的单克隆抗体,为深入研究MIP蛋白的结构和功能奠定了基础。
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关 键 词: | 沙眼衣原体 MIP蛋白 单克隆抗体 鉴定 |
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