| 日本血吸虫pcDNA3．1．（＋）-SjPGK重组质粒的构建及鉴定 |
| |
| 引用本文： | 梁瑜,肖建华,刘传爱,廖力,伍和平,张愉快,杨秋林.日本血吸虫pcDNA3．1．（＋）-SjPGK重组质粒的构建及鉴定[J].实用预防医学,2004,11(6):1092-1094. |
| |
| 作者姓名： | 梁瑜 肖建华 刘传爱 廖力 伍和平 张愉快 杨秋林 |
| |
| 作者单位： | 南华大学医学院寄生虫学教研室,湖南,衡阳,421001 |
| |
| 基金项目： | 湖南省教育厅资助项目 (No .0 2C392 ) |
| |
| 摘 要： | 目的 构建日本血吸虫中国大陆株磷酸甘油酸激酶基因片段(SiPGK)的真核表达重组质粒，寻找新的预防日本血吸虫病的候选疫苗分子。方法 采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)技术，从日本血吸虫总RNA中体外扩增SPGK基因片段；克隆人pMD18-T载体中，然后挑取阳性克隆经双酶切分析、PCR鉴定；亚克隆人真核表达载体pcDNA3．1( )中，阳性克隆经鉴定后进行脱氧核糖核酸序列测定；运用Blast程序，将测序结果及其推导的编码氨基酸序列与NCBI数据库在核苷酸水平和氨基酸水平进行同源性比较。结果 RT-PCR特异性扩增出一条长约830bp大小的条带；重组质粒pMD18-T-SPGK和pcDNA3．1( )-SPGK经双酶切和以质粒为模板进行PCR扩增，均可获得一条与RT-PCR产物一致的DNA片段；脱氧核糖核酸序列测定和分析结果表明：SjPGK基因片段长为830bp，与SmPGK的核苷酸同源性为85％，分值为672；氨基酸同源性为94％，分值为473。结论 成功地构建pcDNA3．1( )-SiPGK重组质粒，为构建其核酸癌苗提供了条件。
|
| 关 键 词： | 日本血吸虫 磷酸甘油酸激酶 基因克隆 序列测定 |
| 文章编号： | 1006-3110(2004)06-1092-03 |
| 修稿时间： | 2004年8月22日 |
The Construction and Identification of Recombinant Plasmids of pcDNA3.1(+)-SjPGK of Schistosoma japonicum |
| |
| LIANG Yu,XIAO Jian-hua,LIU Chuan-ai,et al..The Construction and Identification of Recombinant Plasmids of pcDNA3.1(+)-SjPGK of Schistosoma japonicum[J].Practical Preventive Medicine,2004,11(6):1092-1094. |
| |
| Authors: | LIANG Yu XIAO Jian-hua LIU Chuan-ai |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Schistosoma japonicum (Sj) Phosphoglycerate kinase (PGK) Gene cloning Sequencing |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
