稳定性骨折愈合对软骨细胞增生和凋亡的影响

目的:骨折愈合过程中骨折断端间稳定性对软骨细胞增生、分化与凋亡的影响。方法:实验于2004-04/11在第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤实验室完成。选择8～10周的野生型小鼠48只,分成两组,每组24只。制作小鼠胫骨不稳定模型(不稳定骨折组)和稳定模型(稳定骨折组)。于3,5,7,10,14,21d取材,每组各时间点4只。用X射线片、苏木素-伊红染色、5-溴-2脱氧尿苷染色、原位杂交等手段检测软骨细胞在整体、组织、细胞水平中软骨细胞增生、分化与凋亡的差异。5-溴-2脱氧尿苷阳性细胞为棕色的细胞核,代表正在增生期的细胞;原位杂交阳性细胞为胞浆内蓝色的颗粒,Ⅱ型胶原探针为阳性表示增殖和分化的软骨细胞,Ⅹ型胶原探针为阳性表示肥大的软骨细胞。结果:48只小鼠均进入结果分析。①两组小鼠胫骨愈合X射线检测结果:骨折后第21天不稳定骨折组骨折断端间仍有较多骨痂,稳定骨折组已基本完成骨痂的重新塑性。②软骨细胞组织学观察:第21天苏木精-伊红染色可见不稳定骨折组骨折断端间软骨细胞正被成骨细胞替代,而稳定骨折组基本完成骨痂的重新塑性,与X射线结果相符合。③软骨细胞增生的检测结果:小鼠骨折后的5-溴-2脱氧尿苷染色第3,10,14天可见不稳定骨折组有大量软骨细胞增生,增生的成骨细胞并不多,而稳定骨折组增生的软骨细胞较少,被大量增生活跃的成骨细胞替代。④原位杂交检测软骨细胞标记物结果:两组骨痂中的软骨细胞在出现和消失的时间上没有明显的差别。结论:骨折断端间的稳定固定可以减慢软骨细胞的增生,加速其凋亡,但对软骨细胞的分化没有明显影响。

Influence of stable fracture healing on proliferation and apoptosis of chondrocytes