| 抗人TIM-3单克隆抗体的纯化及其体外生物学功能的研究 |
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| 引用本文： | 岳翠华,孙润孜,陈建新,蒋敬庭,卢斌峰. 抗人TIM-3单克隆抗体的纯化及其体外生物学功能的研究[J]. 临床检验杂志, 2018, 0(5): 375-379 |
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| 作者姓名： | 岳翠华 孙润孜 陈建新 蒋敬庭 卢斌峰 |
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| 作者单位： | 苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心江苏省肿瘤免疫治疗工程技术研究中心苏州大学细胞治疗研究院;上海德思特力生物技术有限公司;美国匹兹堡大学免疫系 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31570877，31570908)；国家科技支撑计划资助项目(2015BAI12B12)；国家自然科学基金海外及港澳学者合作研究基金(31729001)。 |
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| 摘 要： | 目的纯化抗人T细胞免疫球蛋白粘蛋白3(TIM-3)单克隆抗体4E8,检测TIM-3单克隆抗体4E8的体外生物学功能。方法利用单克隆抗体纯化技术获取4E8;用细胞转染技术获得表达人TIM-3分子的细胞系,流式细胞术检测4E8与人TIM-3分子结合的能力以及阻断人TIM-3融合蛋白(TIM-3 Ig-hu Fc)与凋亡细胞表面TIM-3配体磷脂酰丝氨酸(Ptd Ser)结合的能力;混合淋巴细胞反应(MLR)及ELISA法检测4E8对CD4+T细胞分泌IFN-γ的影响。结果 4E8可与人TIM-3分子结合,但不可阻断TIM-3与Ptd Ser的结合。与阴性对照组(958.3±153.2)相比,4E8(10μg/m L组:2 563±150.3,3.33μg/m L组:1 981±211.5)可增强MLR实验中CD4+T细胞分泌IFN-γ的能力,差异有统计学意义(P0.05)。并且与单独使用4E8(10μg/m L组:1 981±211.5,0.33μg/m L组:844±76.2)相比,4E8与程序性死亡受体1(PD-1)抗体nivolumab联合使用(10μg/m L组:3 049±80.5,0.33μg/m L组:1 957±321.3)有协同作用,差异有统计学意义(P0.05)。结论成功纯化出抗人TIM-3单克隆抗体4E8。4E8具有增强CD4+T细胞分泌IFN-γ的能力,但对CD4+T细胞的作用不依赖于阻断TIM-3与其配体Ptd Ser的结合。
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| 关 键 词： | 免疫卡控点；抗体纯化；TIM-3；T细胞 |
| 收稿时间： | 2017-12-23 |
Purification of anti-human TIM-3 monoclonal antibody and its biological function in vitro |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | immune check point antibody purification T cell immunoglobulin mucin-3 T lymphocyte |
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