| EGFR基因G719S和T790M突变载体的构建及临床应用研究 |
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| 引用本文： | 周晶,向花花,肖正午,彭华,张宏金,郭紫芬. EGFR基因G719S和T790M突变载体的构建及临床应用研究[J]. 临床检验杂志, 2018, 0(5): 380-383 |
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| 作者姓名： | 周晶 向花花 肖正午 彭华 张宏金 郭紫芬 |
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| 作者单位： | 南华大学药物药理研究所湖南省分子靶标新药研究协同创新中心 |
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| 基金项目： | 湖南省自然科学基金（2018JJ2350）。 |
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| 摘 要： | 目的构建与宫颈癌组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因G719S和T790M位点突变型重组载体,利用其建立分子开关平台检测宫颈癌EGFR基因突变。方法以野生型重组质粒为模板,利用重叠PCR技术,得到突变型融合目的 DNA片段,再将此目的片段连接入p MD19-T质粒中,构建成突变型重组载体,将其转化入大肠埃希菌E.coli DH5α感受态细胞进行表达,用菌液PCR和基因组测序进行鉴定。设计特异性检测引物,建立分子开关检测平台用于临床宫颈癌样本的检测。结果通过基因组测序证实G719S和T790M突变位点成功引入,定点突变载体构建成功。成功建立了分子开关检测平台用于宫颈癌组织DNA的检测。结论利用重叠PCR技术简便、高效地构建了EGFR基因突变重组载体,并建立了分子开关检测平台,为基因定点突变及临床上检测EGFR基因突变提供了新的技术手段。
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| 关 键 词： | 宫颈癌；表皮生长因子受体基因；定点突变；重叠PCR |
| 收稿时间： | 2018-04-02 |
Construction of EGFR gene G719S and T790M mutation vector and preliminary clinical application |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cervical cancer epidermal growth factor receptor gene site-directed mutagenesis overlap PCR |
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