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shRNA抑制CD147基因表达对HT29细胞增殖、侵袭和致瘤能力的影响
引用本文:李瑞,许晔琼,潘玉琴,何帮顺,高天翼,孙慧玲,邓齐文,王书奎. shRNA抑制CD147基因表达对HT29细胞增殖、侵袭和致瘤能力的影响[J]. 临床检验杂志, 2014, 0(1): 20-24
作者姓名:李瑞  许晔琼  潘玉琴  何帮顺  高天翼  孙慧玲  邓齐文  王书奎
作者单位:南京师范大学生命科学学院,南京 210046/南京医科大学附属南京医院中心实验室,南京 210006;南京医科大学附属南京医院中心实验室,南京 210006;南京医科大学附属南京医院中心实验室,南京 210006;南京医科大学附属南京医院中心实验室,南京 210006;南京医科大学附属南京医院中心实验室,南京 210006;南京师范大学生命科学学院,南京 210046/南京医科大学附属南京医院中心实验室,南京 210006;南京医科大学附属南京医院中心实验室,南京 210006;南京医科大学附属南京医院中心实验室,南京 210006
基金项目:国家自然科学基金项目(81172141);南京市科技发展项目(201108025);南京市医学科技发展项目(ZKX11025);南京市卫生局青年人才项目。
摘    要:目的用RNA干扰(RNAi)技术抑制CD147基因的表达,检测其对人结直肠癌细胞系HT29细胞增殖、侵袭和致瘤能力的影响。方法设计合成CD147特异性的RNA干扰表达质粒pYr-mir30-shRNA,稳定转染HT29细胞,分别获得HT29/shRNA-control和HT29/shRNA细胞;RT-PCR和western blot分别检测CD147、MCT1、MCT4 mRNA和蛋白质的表达;明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9的活性;CCK8法分析细胞的增殖能力;Transwell小室检测细胞的侵袭能力;观察结直肠癌裸鼠皮下移植瘤的致瘤能力。结果与空白组比较,RNA干扰后的细胞中CD147、MCT1 mRNA(F分别为99.645和84.985)及蛋白质(F分别为73.675和19.842)的表达水平均降低(P均0.01);MMP-2和MMP-9的活性均降低(P均0.01);细胞增殖(t分别为7.491、15.023、14.584、6.637和11.211,P均0.01)和侵袭(F=330.443,P0.01)能力均降低,使裸鼠荷瘤能力下降(F=365.679,P0.01)。结论 RNA干扰能有效抑制CD147基因的表达,抑制HT29细胞的增殖和侵袭能力。

关 键 词:RNA干扰;CD147基因;HT29细胞
收稿时间:2013-09-30

Effect of the expression inhibition of CD147 by shRNA on the proliferation, invasion and tumorigenicity of HT29 cells
Abstract:
Keywords:RNA interference   CD147 gene   HT29 cell
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