| miR-34a与人乳腺癌细胞系MCF-7多柔比星耐药的关系 |
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| 引用本文： | 蒋胜高,李秀娟,李文静,钟山亮,唐金海,赵建华.miR-34a与人乳腺癌细胞系MCF-7多柔比星耐药的关系[J].临床检验杂志,2014(1):15-19. |
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| 作者姓名： | 蒋胜高 李秀娟 李文静 钟山亮 唐金海 赵建华 |
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| 作者单位： | 江苏省肿瘤医院临床检验中心，南京 210009;江苏省肿瘤医院普外科，南京 210009;江苏省肿瘤医院临床检验中心，南京 210009;江苏省肿瘤医院临床检验中心，南京 210009;江苏省肿瘤医院普外科，南京 210009;江苏省肿瘤医院临床检验中心，南京 210009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（81272470）。 |
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| 摘 要： | 目的探讨miR-34a对人乳腺癌细胞系MCF-7多柔比星(Adr)耐药性的影响及其潜在分子机制。方法用低浓度逐步加量诱导法,建立MCF-7的Adr耐药细胞系(MCF-7/Adr),用miRNA芯片结合RT-qPCR筛选并验证miRNA在MCF-7/Adr及MCF-7细胞中的表达差异;用生物信息学软件对miR-34a进行基因靶向预测;通过miR-34a模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)转染实验结合MTT、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)观察miR-34a的表达变化对细胞耐药性的影响,western blot检测转染后Notch1蛋白表达水平。结果成功构建MCF-7/Adr耐药亚系;与MCF-7细胞相比,MCF-7/Adr中有156个差异表达miRNA;其中miR-34a的表达水平明显降低(t=11.597,P=0.000)。与阴性对照组相比,转染miR-34a mimic后MCF-7/Adr细胞miR-34a表达水平增高(t=8.013,P=0.001),且增加了对Adr的敏感性(t=18.160,P=0.000);转染miR-34a inhibitor后MCF-7细胞miR-34a的表达水平降低(t=9.979,P=0.000),且降低了对Adr的敏感性(t=4.130,P=0.009)。靶基因预测结果显示,Notch1为miR-34a的特异性靶基因。western blot结果表明,与空白对照组和阴性对照组相比,MCF-7/Adr细胞转染miR-34a mimic后,Notch1蛋白的表达水平下降(F=64.949,P=0.000)。MCF-7细胞转染miR-34a inhibitor后,Notch1蛋白的表达水平升高(F=10.938,P=0.010)。结论 MCF-7/Adr及MCF-7细胞miRNA表达谱存在差异;miR-34a参与调节细胞对Adr的耐药过程,Notch1基因可能是调控靶基因之一。
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| 关 键 词： | 乳腺癌 多柔比星 微小核糖核酸-34a Notch1 耐药 |
| 收稿时间： | 2013/10/20 0:00:00 |
Association of miR-34a with adriamycin resistance in human breast cancer MCF-7 cell line |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | breast cancer adriamycin miR-34a Notch1 drug-resistance |
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