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实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法与RT-PCR法及细胞培养法检测甲3型流行性感冒病毒的比较
引用本文:李婵,卢亦愚,严菊英,冯燕,史雯,茅海燕.实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法与RT-PCR法及细胞培养法检测甲3型流行性感冒病毒的比较[J].中国计划免疫,2005,11(5):360-363.
作者姓名:李婵  卢亦愚  严菊英  冯燕  史雯  茅海燕
作者单位:李婵(浙江省疾病预防控制中心,杭州,310009);卢亦愚(浙江省疾病预防控制中心,杭州,310009);严菊英(浙江省疾病预防控制中心,杭州,310009);冯燕(浙江省疾病预防控制中心,杭州,310009);史雯(浙江省疾病预防控制中心,杭州,310009);茅海燕(浙江省疾病预防控制中心,杭州,310009)
摘    要:目的比较实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、RT-PCR法及细胞培养法检测甲3型流行性感冒(流感)病毒的灵敏度与特异性.方法采用建立的实时荧光定量RT-PCR、RT-PCR及经典的狗肾传代细胞病毒分离等3种方法,同时对流感监测点送检的60份疑似流感标本检测甲3型流感病毒.结果细胞病毒分离的阳性数为10份,RT-PCR与实时荧光定量RT-PCR的阳性数分别为12份和15份.实时荧光定量RT-PCR的灵敏度达0.01TCID50且对甲1型流感病毒、乙型流感病毒、禽流感病毒H5、严重急性呼吸道综合征冠状病毒及其它呼吸道病毒均无交叉反应,从病毒核酸提取至完成检测仅需3h左右.结论实时荧光定量RT-PCR由于检测在密封环境中进行,避免了产物与环境间的交叉污染,且是3种方法中最为快速敏感的方法,适用于公共卫生应急疫情的实验室快速诊断.

关 键 词:实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应  逆转录-聚合酶链反应  细胞培养法  甲3型流行性感冒病毒
文章编号:1006-916X(2005)05-0360-04
修稿时间:2004年12月29
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