| 实时荧光定量RT-PCR检测人外周血单个核细胞中FOXP3 mRNA的表达 |
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| 引用本文： | 蒋卫平,丁茂文,朱亚非,李冰,朱晚林,李欣华,林菲菲.实时荧光定量RT-PCR检测人外周血单个核细胞中FOXP3 mRNA的表达[J].温州医学院学报,2009,39(6):595-598. |
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| 作者姓名： | 蒋卫平 丁茂文 朱亚非 李冰 朱晚林 李欣华 林菲菲 |
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| 作者单位： | 温州医学院附属第五医院,检验科,浙江,丽水,323000 |
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| 摘 要： | 目的：建立实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应（real-time fluorescence quantitative RT-PCR）检测人外周血单个核细胞中FOXP3 mRNA的方法,并研究其与CD4＋CD25＋Treg细胞活性相关性。方法：提取人外周血单个核细胞总RNA,将mRNA逆转录成cDNA,以β-actin为内参照,实时荧光定量RT-PCR检测29例哮喘患儿及24例同龄对照FOXP3 mRNA的相对表达量,采用融解曲线和琼脂糖电泳鉴定PCR产物特异性;同时采用流式细胞技术检测CD4＋CD25＋Treg细胞含量,分析两者相关性。结果：哮喘患儿组CD4＋CD25＋Treg细胞百分率明显低于同龄对照组,P〈0.01;FOXP3 mRNA的表达也显著降低,P〈0.05;FOXP3和β-actin的融解曲线分析表明均仅有单一峰,Tm值分别为82.4℃和87.8℃;琼脂糖电泳显示都仅有单一扩增产物。结论：应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术检测FOXP3 mRNA表达水平简便易行、结果稳定可靠。初步结果证实,外周血CD4＋CD25＋Treg细胞数量和FOXP3 mRNA表达有相同的趋势,存在一定的相关性。
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| 关 键 词： | 实时荧光定量RT-PCR 哮喘 FOXP3 CD4+CD25+调节性T细胞 |
Detection of FOXP3 mRNA expression in human peripheral blood mononuclear cells by real-time fluorescent quantitative RT-PCR |
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| JIANG Wei-ping,DING Mao-wen,ZHU Ya-fei,LI Bing,ZHU Wan-lin,LI Xin-hua,LIN Fei-fei.Detection of FOXP3 mRNA expression in human peripheral blood mononuclear cells by real-time fluorescent quantitative RT-PCR[J].Journal of Wenzhou Medical College,2009,39(6):595-598. |
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| Authors: | JIANG Wei-ping DING Mao-wen ZHU Ya-fei LI Bing ZHU Wan-lin LI Xin-hua LIN Fei-fei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | FOXP3 |
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