| HBV X蛋白对抑癌基因p16的表达和启动子甲基化的影响 |
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| 引用本文： | 康艳红,李威,占伟丽,尚佳,杨林. HBV X蛋白对抑癌基因p16的表达和启动子甲基化的影响[J]. 临床肝胆病杂志, 2016, 0(3): 484-487. DOI: 10.3969/j.issn.1001-5256.2016.03.017 |
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| 作者姓名： | 康艳红 李威 占伟丽 尚佳 杨林 |
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| 作者单位： | 1. 河南省人民医院感染科,郑州,450000;2. 中山大学附属第三医院感染科,广州,510630 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81071409) |
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| 摘 要： | 目的探讨HBV X蛋白(HBx)对抑癌基因p16的表达、p16启动子甲基化的影响,从表观遗传学的角度探讨HBx参与HBV相关性HCC发生发展的相关机制。方法以人肝母细胞瘤细胞Hep G2、表达绿色荧光蛋白(GFP)的Hep G2/GFP、稳定表达HBx蛋白的Hep G2/GFP-HBx细胞为实验系统;采用Western Blot法检测Hep G2、Hep G2/GFP、Hep G2/GFP-HBx细胞中p16蛋白的表达水平。以DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂5-氮杂-2'脱氧胞苷(5-Aza-2'-DC)处理Hep G2/GFP-HBx细胞,采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测Hep G2、Hep G2/GFP细胞及药物处理和未处理的Hep G2/GFP-HBx细胞中抑癌基因p16启动子区域的甲基化情况。计量资料多组间比较采用单因素方差分析。结果 Western Blot分析示Hep G2/GFP-HBx细胞中p16蛋白相对灰度值(23.68±3.93)显著低于Hep G2(91.23±6.87)、Hep G2/GFP(94.55±8.40)细胞,差异均有统计学意义(P值分别为0.0007、0.0014),Hep G2/GFP与Hep G2细胞中p16蛋白相对灰度值差异无统计学意义(P0.05);MSP法检测示Hep G2/GFP-HBx细胞中存在p16基因启动子区域部分Cp G位点甲基化,Hep G2、Hep G2/GFP细胞中未检出其甲基化,DNMT抑制剂5-Aza-2'-DC处理的Hep G2/GFP-HBx细胞却能恢复p16基因启动子区域的未甲基化状态。结论在肝癌细胞系中,HBx通过诱导抑癌基因p16启动子甲基化而下调其表达,DNMT抑制剂5-Aza-2'-DC能恢复p16基因启动子区域的未甲基化状态,这种可逆性修饰可为HBV相关性HCC的治疗、预防提供新思路。
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| 关 键 词： | 细胞系,肿瘤 基因,p16 DNA甲基化 |
Effects of HBV X protein on expression and promoter methylation of p16 tumor suppressor gene |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cell line,tumor genes,p16 DNA methylation |
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