~(125)I放射性粒子持续照射抑制HepG2肝癌细胞增殖的作用机制

目的探讨~(125)I放射性粒子持续照射抑制HepG2人肝癌细胞增殖的作用及诱导凋亡的可能潜在机制。方法以HepG2人肝癌细胞为研究对象,用~(125)I放射性粒子体外照射装置进行持续照射。初始剂量率为5.32 c Gy/h,分别给予0、2及4 Gy照射。通过光镜及Hoechst33258染色观察形态学改变;采用克隆形成实验计算克隆形成率;利用划痕实验检测细胞迁移能力的变化;用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。用Western Blot法检测凋亡相关蛋白表达。2组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果经0、2、4 Gy~(125)I放射性粒子照射HepG2细胞后,用光学显微镜发现4 Gy组细胞密度减少,球形游离死亡细胞数目增多;经Hoechst33258染色后发现4 Gy组可见核固缩、碎裂及边集等凋亡细胞的典型特征。克隆形成实验发现对照组、2Gy组和4Gy组的克隆形成数分别为(120.00±3.61)%、(112.00±2.00)%、(45.00±3.61)%,3组比较差异有统计学意义(F=508.90,P0.001)。划痕愈合实验示,对照组、2 Gy组和4 Gy组的细胞迁移率分别为(21.24±4.36)%、(19.93±3.37)%和(11.42±0.65)%,3组细胞迁移率比较差异有统计学意义(F=8.29,P0.001)。流式凋亡检测示,对照组、2Gy组及4Gy组的HepG2细胞凋亡率分别为(4.33±0.67)%、(6.90±1.31)%和(17.03±1.43)%,3组比较差异有统计学意义(F=110.01,P0.001)。Western Blot检测结果示,~(125)I粒子照射组显著抑制肿瘤增殖相关蛋白PCNA、凋亡蛋白Survivin及Bcl-2的表达,增加促凋亡蛋白Bak、Bax的表达。结论~(125)I放射性粒子通过促进HepG2细胞凋亡,抑制增殖及迁移,从而抑制HepG2细胞的生长,其可能机制与凋亡相关蛋白表达抑制等因素相关。

Effect of continuous irradiation with 125I radioactive seeds in inhibiting HepG2 cell proliferation and related mechanisms