抑制素对HCV复制的影响 |
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引用本文: | 石娟娟,杨宁,张欣,吴凤萍,李梅,高宁,贾晓黎,翟嵩,党双锁.抑制素对HCV复制的影响[J].临床肝胆病杂志,2016(9):1729-1733. |
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作者姓名: | 石娟娟 杨宁 张欣 吴凤萍 李梅 高宁 贾晓黎 翟嵩 党双锁 |
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作者单位: | 西安交通大学第二附属医院感染科,西安,710004 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(81170393) |
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摘 要: | 目的研究抑制素(PHB)对HCV复制的影响。方法全长基因组HCV RNA体外转染人肝癌细胞系Huh7.5,构建HCV全基因组细胞模型,分别收集24、48、72、96 h培养上清液检测HCV拷贝数;间接免疫荧光实验检测HCV核心蛋白的表达;透射电镜观察HCV感染细胞Huh 7.5-HCV的超微结构改变,鉴定HCV全基因组细胞模型。采用实时定量PCR、Western Blotting方法研究PHB在Huh 7.5-HCV细胞中的表达情况。应用RNA干扰技术检测PHB对HCV RNA的复制情况。两组间比较采用t检验。结果鉴定结果显示,成功构建HCV全基因组细胞模型。HCV RNA转染Huh7.5细胞24和48 h后,PHB mRNA表达水平分别是13.41±1.35和16.45±1.76,与对照组(1.01±0.57和1.01±0.87)相比差异均有统计学意义(t值分别为29.540、31.361,P值均0.01);PHB蛋白表达水平亦显著高于对照组(P值均0.01)。PHB的RNA干扰质粒(shRNA-PHB)转染Huh7.5-HCV细胞24和48h后,HCV RNA的水平分别为64.32±5.49和84.45±7.06,显著高于对照组(shRNA-control组,10.52±1.57和16.34±2.97,t值分别为29.538、25.908,P值均0.01)。结论 Huh7.5-HCV细胞中PHB表达的升高可能与HCV RNA的感染有关,PHB蛋白对HCV RNA复制有一定的抑制作用。
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关 键 词: | 肝炎病毒属 细胞系 肿瘤 抑制素类 RNA干扰 |
Effect of prohibitin on hepatitis C virus replication |
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Abstract: | |
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Keywords: | hepacivirus cell line tumor inhibins RNA interference |
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