| 力生长因子重组腺病毒载体构建及其在成骨细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 邱敏,唐丽灵. 力生长因子重组腺病毒载体构建及其在成骨细胞中的表达[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2010, 14(37). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.37.002 |
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| 作者姓名： | 邱敏 唐丽灵 |
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| 作者单位： | 重庆大学生物工程学院"生物流变科学与技术"教育部重点实验室,重庆市,400044 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(30600130):"力信号调控成骨细胞IGF-I剪接变异体表达的研究",国家自然科学基金面上项目,"力信号调控的成骨细胞IGF-I交替剪接的加工机制研究",重庆大学研究生科技创新基金(200904AIA0010308):"过载环境下成骨细胞IGF-I剪接变异体MGF的表达研究" |
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| 摘 要： | 背景:研究表明,力生长因子(mechano-growth faotor,MGF)能激活卫星细胞,促进成肌细胞增殖.在治疗肌损失、预防心肌损伤和修复神经损伤等方面有重要的作用.机械拉伸可使成骨细胞表达MGF,但是MGF对骨组织生理生化行为的影响机制尚不清楚.目的:应用携带MGF基因的重组腺病毒载体转染成骨细胞,观察MGF在成骨细胞中的表达.方法:将MGF基因插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,构建pAdTmck-MGF重组体.pAdTrack-MGF与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183菌中进行同源重组,生成重组腺病毒质粒pAdEasy-MGF.脂质体介导pAdEasy-MGF转染293A细胞,包装成整的重组腺病毒Ad/MGF.用Ad/MGF感染原代培养的大鼠成骨细胞,荧光示踪计数法测定感染效率,RT-PCR法对重组腺病毒感染结果进行鉴定.结果与结论:实验构建的重组腺病毒载体Ad/MGF滴度可达8.5×108pfu/mL.Ad/MGF能高效感染体外培养的Wistar大鼠成骨细胞并表达目的基因,当感染复数为100时,感染效率最高.说明实验构建的Ad/MGF重组腺病毒可在大鼠成骨细胞中有效表达.
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| 关 键 词： | 力生长因子 腺病毒 转染 成骨细胞 载体构建 骨组织工程 |
Construction of recombinant adenovirus vector containing mechano-growth factor gene and its expression in rat osteoblasts |
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| Qiu Min,Tang Li-ling. Construction of recombinant adenovirus vector containing mechano-growth factor gene and its expression in rat osteoblasts[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2010, 14(37). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.37.002 |
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| Authors: | Qiu Min Tang Li-ling |
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