双酚A对大鼠睾丸支持细胞糖代谢的影响

目的:观察不同浓度双酚A(BPA)对原代培养大鼠睾丸支持细胞(SC)糖代谢及乳酸脱氢酶(LDH)表达的影响,探讨BPA致男性不育的机制。方法:采用两步酶消化法分离雄性Wistar大鼠睾丸SC,建立SC原代培养模型,免疫组化鉴定Fas L。传代后SC随机分为对照组和实验组(100 nmol/L、10μmol/L和1 mmol/L BPA)。培养48 h后,CCK-8法测定细胞增殖活性,核磁共振波谱法测定细胞内代谢物浓度,RT-PCR及Western印迹检测LDH的表达。结果:体外分离培养SC的纯度为(96.05±1.28)%(n=10),CCK-8实验结果显示:与对照组相比,暴露于100 nmol/L BPA组(98±8)%]、10μmol/L BPA组(96±3)%]和1 mmol/L BPA组(95±3)%]的细胞增殖率无明显变化(P0.05);核磁共振波谱显示:与对照组相比,10μmol/L和1 mmol/L BPA作用下SC内葡萄糖及乳酸浓度明显降低(P0.05);RT-PCR及Western印迹结果显示:LDH mRNA的表达随BPA浓度升高呈现降低趋势(100 nmol/L、10μmol/L及1 mmol/L组P均0.05),而LDH蛋白的表达只在1 mmol/L组明显降低(P0.05)。结论:较高浓度BPA降低LDH,影响SC糖代谢过程。推测BPA通过影响SC糖代谢,减少向生殖细胞乳酸的供给,影响精子发生过程。

Bisphenol A alters glucose metabolism in rat Sertoli cells in vitro