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pSilencer1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒的构建及其在体外人脐静脉内皮细胞中抑制Ang2.Tie2基因的表达
引用本文:王彪,郭国祥,林菊丽,单秀英,张声,鲁开化. pSilencer1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒的构建及其在体外人脐静脉内皮细胞中抑制Ang2.Tie2基因的表达[J]. 中国现代医学杂志, 2011, 21(5)
作者姓名:王彪  郭国祥  林菊丽  单秀英  张声  鲁开化
作者单位:1. 福建医科大学附属第一医院,整形外科,福建,福州,350005
2. 福建医科大学附属第一医院,病理科,福建,福州,350005
3. 第四军医大学西京医院,整形外科研究所,陕西,西安,710043
基金项目:卫生部科学研究基金-福建省卫生教育联合攻关计划(WKJ2008-2-51); 福建省自然科学基金计划项目(No:2007J0269); 福建省教育厅科技项目(No:JB08088)
摘    要:目的 探讨应用RNA干扰(RNAi)技术抑制Ang2、Tie2基因的表达情况,为进一步研究其在体外抑制血管生成以及抑制肿瘤血管生成的动物实验研究奠定基础.方法 构建pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒各2条并予以鉴定.用pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒转染人脐静脉内皮细胞(HUVECs),采用免疫细胞化学染色和RT-PCR方法检测各组HUVECs中Ang2及Tie2的蛋白及mRNA的表达状况.结果 成功构建pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒各2条,用其转染HUVECs后,免疫细胞化学染色和RT-PCR检测结果显示,Ang2、Tie2在蛋白和mRNA的表达水平均受到明显抑制(P<0.05),并且siRNA的2条重组质粒之间均差异无统计学意义(P>0.05).结论 pSilencer 1.0-u6-Ang2/Tie2-siRNA在体外能够抑制HUVECs的Ang2和Tie2的蛋白及mRNA的表达.

关 键 词:RNA干扰  促血管生成素2  受体Tie2  质粒载体  脐静脉内皮细胞

Construction of pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA expressing plasmid vectors and the inhibitory effects on the expression of Ang2/Tie2 in HUVECs
WANG Biao , GUO Guo-xiang , LIN Ju-li , SHAN Xiu-ying , ZHANG Sheng , LU Kai-hua. Construction of pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA expressing plasmid vectors and the inhibitory effects on the expression of Ang2/Tie2 in HUVECs[J]. China Journal of Modern Medicine, 2011, 21(5)
Authors:WANG Biao    GUO Guo-xiang    LIN Ju-li    SHAN Xiu-ying    ZHANG Sheng    LU Kai-hua
Affiliation:WANG Biao1,GUO Guo-xiang1,LIN Ju-li1,SHAN Xiu-ying1,ZHANG Sheng2,LU Kai-hua3(1.Department of Plastic Surgery,2.Department of Pathology,the First Affiliated Hospital,Fujian Medical University,Fuzhou,Fujian 350005,P.R.China,3.the Centre of Plastic Surgery,Xijing Hospital,the Fourth Military Medical University,Xi'an,Shanxi 710043,P.R.China)
Abstract:
Keywords:RNA interference  angiopoietin2  Tie2 receptors  plasmids vector  HUVECs  
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