| 杆状病毒多基因表达系统介导的轮状病毒样颗粒表达与组装 |
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| 引用本文： | 龙虎,姚伦广,王姗姗,陈士新,谭佩婵,孙京臣. 杆状病毒多基因表达系统介导的轮状病毒样颗粒表达与组装[J]. 南方医科大学学报, 2010, 30(7) |
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| 作者姓名： | 龙虎 姚伦广 王姗姗 陈士新 谭佩婵 孙京臣 |
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| 作者单位： | 华南农业大学动物科学学院,广东,广州,510642;南阳师范学院伏牛山昆虫生物学重点实验室,河南,南阳,473061;南阳师范学院伏牛山昆虫生物学重点实验室,河南,南阳,473061;华南农业大学动物科学学院,广东,广州,510642;海军广州基地赤沙干休所,广东,广州,510230 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，广东省自然科学基金，华南农业大学校长基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建能同时表达轮状病毒vp2、vp6、vp7基因的重组家蚕杆状病毒,并在BmN细胞中进行初步表达.方法 利用MA104细胞繁殖人A组轮状病毒,RT-PCR扩增病毒结构蛋白vp2、vp6、vp7基因,连接至转移载体pFBDM和pUCDM中,同时引入含IE1启动子的绿色荧光蛋白基因利于检测感染和表达量,再分别通过Tn7及Cre-LoxP重组构建重组病毒.为方便检测基因的表达,在VP7的C-末端添加6-组氨酸(6-His)标签,可通过ELISA等方法快速检测目的 基因表达.结果 扩增获得了轮状病毒三个结构蛋白基因,构建了能高效组装轮状病毒样颗粒的重组表达载体,ELISA检测VP7得到了表达,在BmN细胞中观察到病毒样颗粒.结论 成功构建杆状病毒多基因的表达系统,为生产多哑基蛋白复合物,研究大分子结构提供借鉴.
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| 关 键 词： | 轮状病毒样颗粒 家蚕杆状病毒 多基因表达系统 BmN细胞 疫苗 |
Expression and assembly of rotavirus-like particles in insect cells mediated by recombinant Bombyx mori MultiBac |
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| LONG Hu,YAO Lun-guang,WANG Shan-shan,CHEN Shin-xin,TAN Pei-chan,SUN Jing-chen. Expression and assembly of rotavirus-like particles in insect cells mediated by recombinant Bombyx mori MultiBac[J]. Journal of Southern Medical University, 2010, 30(7) |
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| Authors: | LONG Hu YAO Lun-guang WANG Shan-shan CHEN Shin-xin TAN Pei-chan SUN Jing-chen |
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| Affiliation: | LONG Hu1,2,YAO Lun-guang2,WANG Shan-shan1,CHEN Shin-xin3,TAN Pei-chan1,SUN Jing-chen1 1College of Animal Science,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China,2Henan Provincial Key Laboratory of Funiu Mountain Insect Biology,Nanyang Normal University,Nanyang 473061,3Naval Base in Guangzhou,Chisha Sanatorium for Retired Cadres,Guangzhou 510230 |
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| Abstract: | Objectives To construct recombinant baculoviruses co-expressing three structural genes vp2, vp6 and vp7 of rotavirus, and assemble rotavirus-like particles (VLPs) in BmN cells. Methods Human group A rotavius was cultivated in MA104 cells, and the RNA was extracted and the three genes were obtained by RT-PCR. The PCR products were inserted into the transfer vectors pFBDM and pUCDM, respectively. A enhanced green fluorescent protein gene (egfp) driven by IE1 promoter was introduced into pFBDM to investigate t... |
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| Keywords: | rotavirus-like particles Bombyx mori nucleopolyhedrovirus BmMultiBac BmN cells vaccine |
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