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| 从噬菌体肽库中筛选并鉴定CD13特异性结合肽 | |
| 引用本文： | 张勇,吕毅,张谞丰,于良,刘昌,张妮,王浩华,万真,谢占涛,胡良硕,展翰翔.从噬菌体肽库中筛选并鉴定CD13特异性结合肽[J].南方医科大学学报,2010,30(4). |
| 作者姓名： | 张勇 吕毅 张谞丰 于良 刘昌 张妮 王浩华 万真 谢占涛 胡良硕 展翰翔 |
| 作者单位： | 1. 西安交通大学医学院第一附属医院胸外科,西安,陕西,710061 2. 西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科,西安,陕西,710061 3. 西安交通大学医学院第一附属医院感染科,西安,陕西,710061 |
| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研基金 |
| 摘 要： | 目的 筛选并鉴定可和单核细胞表面CD13分子特异性结合的特异性短肽.方法 以CD13为靶分子,用噬菌体展示十二肽库进行筛选,通过亲和富集法筛选表达有特异性结合肽的噬菌体,ELISA鉴定所挑选噬菌体和CD13的亲和力,根据噬菌体基因序列推导出多肽序列.对筛选到的并经比对分析认为有生物学特性的多肽进行人工合成,通过免疫荧光技术检测多肽和THP-1细胞的结合情况、位置及WM15对多肽和细胞结合的阻断作用.结果 经过四轮筛选,与CD13特异性结合的噬菌体得到有效富集并最终接近饱和状态.第4轮筛选后回收率与第1轮相比,富集了30倍.挑取的20个噬菌体单克隆中,经ELISA鉴定有10个和CD13的亲和力较高,有阳性意义.经比对得到2个有生物学功能的多肽序列P9、P7,它们分别和人巨细胞病毒(HCMV)UL38、UL105基因编码的相应氨基酸序列有83%、100%相似性.免疫荧光检测可见多肽P9、P7和THP-1细胞的结合位于细胞膜表面.WM15可以不同程度的阻断多肽和细胞的结合.结论 成功筛选出了2条可和CD13特异性结合的短肽P9、P7,而且P9、P7可以和THP-1细胞膜表面的CD13分子特异性结合. |
| 关 键 词： | 人巨细胞病毒 噬菌体展示肽库 |
Screening and identification of CD13-binding peptides with phage display peptide library |
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| ZHANG Yong,L Yi,ZHANG Xu-feng,YU Liang,LIU Chang,ZHANG Ni,WANG Hao-hua,WAN Zhen,XIE Zhan-tao,HU Liang-shuo,ZHAN Han-xiang.Screening and identification of CD13-binding peptides with phage display peptide library[J].Journal of Southern Medical University,2010,30(4). | |
| Authors: | ZHANG Yong L Yi ZHANG Xu-feng YU Liang LIU Chang ZHANG Ni WANG Hao-hua WAN Zhen XIE Zhan-tao HU Liang-shuo ZHAN Han-xiang |
| Institution: | ZHANG Yong,L(U) Yi,ZHANG Xu-feng,YU Liang,LIU Chang,ZHANG Ni,WANG Hao-hua,WAN Zhen,XIE Zhan-tao,HU Liang-shuo,ZHAN Han-xiang |
| Abstract: | Objective To screen and identify the peptides that specifically bind to CD13 on monocytes.Methods The phages capable of specific binding to CD13 were screened in the phage-displayed 12-peptide library.The affinity of the selected phages with CD13 was verified with enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).The sequences of the peptides bound to the phages were deduced according to the phage DNA sequences,and the functional peptides aligned using the BLASTP on the Website NCBI were synthesized.To analyze the ... |
| Keywords: | CD13 |
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