| 酪氨酸羟化酶重组腺病毒在293细胞中的表达及体外活性测定 |
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| 引用本文： | 王文举,孙茂盛,严敏,谢天宏,张光明,李鸿钧. 酪氨酸羟化酶重组腺病毒在293细胞中的表达及体外活性测定[J]. 南方医科大学学报, 2010, 30(4): 681 |
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| 作者姓名： | 王文举 孙茂盛 严敏 谢天宏 张光明 李鸿钧 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所,云南,昆明,650118 |
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| 摘 要： | 目的 构建一种能够携带酪氨酸羟化酶(TH)进入帕金森氏病动物模型体内的重组腺病毒,该病毒能够使TH基因转录并且能够翻译成具有活性的功能蛋白.方法 将TH基因插入穿梭质粒,重组穿梭质粒与腺病毒基因组在BJ-5183中进行同源重组,将重组成功的腺病毒基因组转染293细胞,使其在293细胞中包装出重组腺病毒,RT-PCR和免疫荧光检测目的基因的转录和表达.利用毛细管电泳法检测L-DOPA的生成.结果 成功构建能够表达TH基因的重组腺病毒,RT-PCR能够扩增目的插入片段,毛细管电泳能够检测到L-DOPA的生成.结论 该重组腺病毒能够在体外很好地表达具有活性的酪氨酸羟化酶,为利用该基因对帕金森氏病动物模型进行基因治疗打下基础.
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| 关 键 词： | 酪氨酸羟化酶 重组腺病毒 帕金森病 毛细管电泳 |
Recombinant adenovirus-mediated expression of tyrosine hydroxylase in 293 cells and activity assay of the expressed protein in vitro by capillary electrophoresis |
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| WANG Wen-ju,SUN Mao-sheng,YAN Min,XIE Tian-hong,ZHANG Guang-ming,LI Hong-jun. Recombinant adenovirus-mediated expression of tyrosine hydroxylase in 293 cells and activity assay of the expressed protein in vitro by capillary electrophoresis[J]. Journal of Southern Medical University, 2010, 30(4): 681 |
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| Authors: | WANG Wen-ju SUN Mao-sheng YAN Min XIE Tian-hong ZHANG Guang-ming LI Hong-jun |
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| Affiliation: | WANG Wen-ju,SUN Mao-sheng,YAN Min,XIE Tian-hong,ZHANG Guang-ming,LI Hong-jun Institute of Medical Biology,Chinese Academy of Medical Science,Peking Union Medical College,Kunming 650118,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tyrosine hydroxylase recombinant adenovirus Parkinson disease capillary electrophoresis |
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