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LUNX基因增强子的克隆及调控活性分析
引用本文:邓永键,王爽,郑林,唐娜,肖小琴. LUNX基因增强子的克隆及调控活性分析[J]. 南方医科大学学报, 2010, 30(9): 2025
作者姓名:邓永键  王爽  郑林  唐娜  肖小琴
作者单位:南方医科大学基础医学院病理学系,广东,广州,510515;南方医科大学基础医学院病理学系,广东,广州,510515;南方医科大学基础医学院病理学系,广东,广州,510515;南方医科大学基础医学院病理学系,广东,广州,510515;南方医科大学基础医学院病理学系,广东,广州,510515
基金项目:国家自然科学基金,南方医科大学基础医学院院长基金
摘    要:目的 鉴定人肺特异性X蛋白(lungspecific X protein,LUNX)基因的增强子及其调控活性.方法 以人基因组DNA为模板,PCR扩增生物信息学预测的3个增强子片段(E1:+3770~+3959bp;E2:+6454~+6555bp;E3:+14553~+14652bp),通过荧光素酶报告基因表达体系检测转录活性.结果 PCR产物经测序证实后,分别定向连接至pGL3-Promoter载体中报告基因启动子上游的KpnⅠ和XhoⅠ酶切位点和报告基因下游的BamHI和SalⅠ酶切位点上,经酶切鉴定后,构建了6种荧光素酶报告基因表达体系.以pSV-β-Galactosidase质粒为内对照,瞬时转染HEK293细胞,培养48h后检测细胞裂解液中荧光素酶活性.当3个DNA片段位于报告基因启动子上游时,均不具有增强转录的能力.将它们分别连接于报告基因下游时,E1和E3所调控的荧光索酶活性分别是对照pGL3-Promoter的2.83倍(P<0.05)和1.59倍(p<0.05).结论 LUNX基因的+3770~+3959bp和+14553~+14652bp序列具有增强转录的能力,为LUNX表达调控机制的深入研究奠定了基础.

关 键 词:LUNX基因  增强子  转录调控  荧光素酶活性

Cloning of human LUNX gene enhancers and analysis of transcriptional regulation
DENG Yong-jian,WANG Shuang,ZHENG Lin,TANG Na,XIAO Xiao-qin. Cloning of human LUNX gene enhancers and analysis of transcriptional regulation[J]. Journal of Southern Medical University, 2010, 30(9): 2025
Authors:DENG Yong-jian  WANG Shuang  ZHENG Lin  TANG Na  XIAO Xiao-qin
Affiliation:DENG Yong-jian,WANG Shuang,ZHENG Lin,TANG Na,XIAO Xiao-qin Department of Pathology,College of Basic Medical Sciences,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China
Abstract:
Keywords:human lung specific X protein gene  enhancer  transcriptional regulation  luciferase activity  
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