改良CAM移植瘤模型的制备及其对肿瘤血管新生抑制药物的筛选效果

目的： 以改良方法在鸡胚绒膜尿囊膜（chick chorioallantoic membrane，CAM）上接种人成神经胶质瘤U87细胞制备移植瘤，验证改良模型筛选抗肿瘤血管新生药物的有效性和可行性。 方法： 将鸡胚种蛋随机分为2组，分别使用传统方法与改良方法建立CAM-U87移植瘤模型；改良方法在鸡胚孵育中增加9~16 h的开窗适应期，再将特制的硅胶圈放置在CAM组织一级血管的半侧；硅胶圈内接种U87细胞建立CAM-U87移植瘤模型。模型的硅胶圈内分别加入经典抗血管新生药物沙利度胺（50、100、200 μg/ml）和自主研发抗血管新药G3B6，以DMSO为对照；体视显微镜观察肿瘤形态，H-E染色法观察瘤组织新生微血管密度 (microvessel density，MVD），原位杂交（in situ hybridization，ISH）技术检测血管标记物VEGFR2的表达。 结果： 成功制备改良CAM-U87细胞移植瘤，改良模型不影响CAM本身的血管生成，其瘤细胞接种成功率较传统模型显著升高\（70.00±4.226）% vs (41.25±5.154)%；t=4.314，P=0.000 7\]，移植瘤体积显著增大\（60.20±6.012）vs （15.97±2.403）mm 3；t=6.012，P<0000 1\]。沙利度胺和G3B6两药均能显著抑制移植瘤组织中的血管形成，使瘤组织中MVD显著降低\沙利度胺200 μg/ml时（15.85±1.15）% vs （29.80±4.16）%；t=2.49，P=0.047 4\]、VEGFR2表达明显减少。 结论： 改良方法 成功制备CAM-U87移植瘤模型，经沙利度胺和G3B6验证，该模型对抗肿瘤血管新生药物的筛选具有良好的有效性和可行性。

Development and application of a modified chick embryo chorioallantoic membrane xenograft model of tumorigenesis in screening tumor angiogenesis inhibitors