| 绿荧光蛋白基因质粒表达载体对SACC-83的转染效率及瞬时表达特点 |
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| 引用本文： | 苏涛. 绿荧光蛋白基因质粒表达载体对SACC-83的转染效率及瞬时表达特点[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2007, 11(6): 1087-1090 |
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| 作者姓名： | 苏涛 |
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| 作者单位： | 湖州师范学院医学院,浙江省湖州市,313000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;教育部高等学校博士学科点专项科研基金 |
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| 摘 要： | 目的:检测绿荧光蛋白基因(EGFP)质粒表达载体pACCMV-EGFP和pACTERT-EGFP对SACC-83的转染效率及瞬时表达,为应用这两种启动子诱导促凋亡基因转染SACC-83以发挥治疗作用提供依据。方法:实验于2004-07/2005-05在吉林大学口腔医学院口腔生物实验室完成。①在体外扩增并酶切鉴定pACCMV-EGFP和pACTERT-EGFP质粒。②以脂质体介导法转染pACCMV-EGFP和pACTERT-EGFP进入SACC-83细胞,根据质粒和脂质体比例不同分别转染6组,1组:1g/4L;2组:1g/8L;3组:1g/12L;4组:2g/4L;5组:2g/8L;6组:2g/12L。③应用荧光显微镜观察各组转染效率及瞬时表达情况,并进行统计学分析。结果:①质粒的检测及鉴定:质粒pACTERT-EGFP和pACCMV-EGFP经转化、酶切电泳证实,均出现约800bp的片段,与原作者提供的数据一致。②荧光显微镜观察:绿荧光蛋白在基因转染24h后开始表达,48～72h最高,1周后表达逐渐减弱。③荧光细胞数的统计学分析:对不同浓度质粒与脂质体转染72h的荧光细胞数进行方差分析,质粒与脂质体比例为1g/8L和2g/8L组荧光细胞数显著高于其余各组,其差异具有统计学意义,说明转染效率与脂质体和质粒的比例有关。结论:按照合适的质粒和脂质体比例,pACCMV-EGFP和pACTERT-EGFP转染SACC-83的效率可以达到30%,是转染SACC-83较为理想的瞬时表达载体。
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| 关 键 词： | 绿色荧光蛋白质类 癌,腺样囊性 基因 转染 脂质体 |
| 文章编号： | 1673-8225（2007）06-01087-04 |
| 修稿时间： | 2006-07-312006-08-14 |
Characteristics of transfection efficiency and transient expression of plasmid expression vectors coding green fluorescent protein gene transferred into SACC-83 |
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| Su Tao. Characteristics of transfection efficiency and transient expression of plasmid expression vectors coding green fluorescent protein gene transferred into SACC-83[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2007, 11(6): 1087-1090 |
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| Authors: | Su Tao |
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| Affiliation: | Medical College, Huzhou Teachers College, Huzhou 313000, Zhejiang Province, China |
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