在线衍生-高效液相色谱法测定尿中N-乙酰-S-(2-氨基甲酰乙基)-半胱氨酸

目的建立尿样中N-乙酰-S-(2-氨基甲酰乙基)-半胱氨酸的在线衍生-高效液相色谱测定方法。方法尿样中N-乙酰-S-(2-氨基甲酰乙基)-半胱氨酸经酸水解成S-2-羧乙基半胱氨酸,经碱中和后,在高效液相色谱仪自动进样器中使用邻苯二甲醛自动衍生,生成荧光衍生物,经C18色谱柱分离,用荧光检测器在发射波长为340 nm,激发波长为450 nm下测定荧光强度;通过实验比较不同的衍生剂浓度及用量,选择最佳的衍生化条件。结果本法在5.3μmol/L~79.5μmol/L线性相关系数为0.999 2,最低检出浓度为2.12μmol/L(1 ml尿样),批内精密度为6.27%~8.70%,批间精密度为3.63%~8.26%;加标回收率为97.65%~99.06%,初步发现吸烟者尿液中AAMA平均含量明显高于非吸烟者的平均含量。结论该方法操作简单,自动化程度高,灵敏,准确,精密度高,可用于尿中N-乙酰-S-(2-氨基甲酰乙基)-半胱氨酸的测定。