| 恒温核酸扩增方法的建立及其扩增产物的鉴定 |
| |
| 引用本文： | 高建恩,陶其敏,冯百芳,蒋栋.恒温核酸扩增方法的建立及其扩增产物的鉴定[J].中华检验医学杂志,1997(2). |
| |
| 作者姓名： | 高建恩 陶其敏 冯百芳 蒋栋 |
| |
| 作者单位： | 北京医科大学附属人民医院肝病研究所 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金,美国中华医学会洛氏基金 |
| |
| 摘 要： | 目的建立一种快速、简便的恒温核酸扩增（ＮＡＳＢＡ）方法。方法用由ＡＭＶＲＴａｓｅ、ＲＮａｓｅＨ、Ｔ７ＲＮＡ聚合酶以及相应的缓冲成分组成的恒温扩增系统，对４例丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ区ＲＮＡ序列进行扩增，并通过Ｎｏｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交及限制性内切酶对扩增产物进行鉴定。结果经９０分钟或１８０分钟反应后均可扩增出预期大小的产物，放射自显影在预期位置出现阳性杂交信号。扩增产物经聚合酶链反应（ＰＣＲ）及内切酶ＳｍａⅠ消化后产生预期大小的１４４ｂｐ和３５９ｂｐ的片段，第１次ＰＣＲ产物经转录实验后与ＮＡＳＢＡ直接扩增的产物具有较好的同源性。结论ＮＡＳＢＡ法是一种快速简便的核酸扩增方法，此法扩增出的产物具有良好的特异性。
|
| 关 键 词： | 核糖核酸 基因扩增 |
Nucleic acid isothermal amplification and its product |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | RNA Gene amplification |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
