液氮低温保存阿米巴的研究

Raether等将冻存后阿米巴以人工培养测定其存活率,认为采用最适宜的培养液是提高存活率的关键.本试验用三种培养液进行比较。 采用长期培养于琼脂血清盐水培养基的龟蛇阿米巴原虫(Entamoebarreti),冻存时取48h繁殖良好的滋养体,做了三次试验:(1)将含大量阿米巴培养液离心沉淀,在冰浴下加入含20％小牛血清以及5％甘油或5％二甲基亚砜(DMSO)保护剂的台氏液,混匀后分装液氮管中,4℃预冷30min,以WKL-3微机程控冷冻装置,以1℃/min的速度,降至-30℃,恒温30min,即投入液氮(-196℃)冻存。4天后快速复苏,镜检虫体形态和活动情况,后人工培养观察生长和繁殖。(2)同上法处理后的阿米巴培养液,加入含20％小牛血清及5％甘油或5％DMSO或7.5％乙二醇保护剂的一种的50％或100％199培养液(先经过50％199液)中,同上法低温保存。