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| RNAi沉默卵巢癌耐药细胞株SKOV3/ADM内源H-ras基因表达对细胞增殖能力的影响 | |
| 引用本文： | 王萍玲,胡丽娜,张君,邓凯贤,黄爱龙.RNAi沉默卵巢癌耐药细胞株SKOV3/ADM内源H-ras基因表达对细胞增殖能力的影响[J].现代妇产科进展,2006,15(5):328-331,F0003. |
| 作者姓名： | 王萍玲 胡丽娜 张君 邓凯贤 黄爱龙 |
| 作者单位： | 1. 重庆医科大学附属第二医院,重庆,400010 2. 四川大学华西第二医院妇产科 3. 重庆医科大学病毒性肝炎研究所 |
| 摘 要： | 目的:构建靶向于卵巢癌耐药细胞株中高表达的H-ras癌基因的短发夹状RNA重组质粒,研究它对卵巢癌耐药细胞株SKOV3/ADM内源H-ras基因表达的抑制作用以及H-ras基因与卵巢癌发生和耐药的关系。方法:运用基因克隆技术构建靶向于H-ras基因的重组质粒pshRNA/H-ras并转染至卵巢癌耐药细胞株SKOV3/ADM,通过W est-ern blot、RT-PCR检测H-ras蛋白的表达及mRNA转录水平的变化;MTT法检测它对SK-OV3/ADM细胞增殖的抑制作用,AO/EB实验检测pshRNA/H-ras对SKOV3/ADM细胞凋亡的影响。结果:构建的两重组质粒pshRNA/H-ras1、2均能明显抑制H-ras基因的表达。蛋白质印迹结果表明,转染重组质粒pshRNA/H-ras1、2的SKOV3/ADM细胞靶蛋白的抑制率分别为86.87%和92.21%,RT-PCR检测到H-ras基因mRNA转录水平下降;pshR-NA/H-ras1、2明显抑制SKOV3/ADM细胞的增殖,MTT检测转染48h后的抑制率分别为62.4%和47.9%,AO/EB实验观测到转染24h和48h的细胞凋亡率分别为20.3%和35.6%。结论:H-ras基因在耐药的卵巢癌细胞增殖与凋亡过程中发挥作用,重组质粒pshRNA/H-ras可有效地抑制SKOV3/ADM细胞内源H-ras基因的表达和mRNA的转录,并抑制细胞的增殖和促进凋亡的发生,为化疗耐受的肿瘤细胞提供了新的基因治疗手段。 |
| 关 键 词： | RNA干扰 卵巢癌耐药细胞株 基因 H-ras 增殖 细胞凋亡 |
| 文章编号： | 1004-7379（2006）05-0328-04 |
| 收稿时间： | 2005-12-20 |
| 修稿时间： | 2005-12-20 |
The proliferative effect on silencing of endogenetic H-ras gene expression by RNA interference in ovarian cancer resistant strain SKOV3/ADM |
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| Wang Pingling,Hu Lirta,Zhang Jun,et al..The proliferative effect on silencing of endogenetic H-ras gene expression by RNA interference in ovarian cancer resistant strain SKOV3/ADM[J].Current Advances In Obstetrics and Gynecology,2006,15(5):328-331,F0003. | |
| Authors: | Wang Pingling Hu Lirta Zhang Jun |
| Institution: | 1. The second Affiliated Hospital, Chongqing University of Medical Science, Chongqing 400010;2. Department of Obstetrics and Gynecology,West China Second Hospitial,Sichuan University ;3. Institute for Virus Hepatitis, Chongqing Medical University |
| Abstract: | |
| Keywords: | RNA interfering Ovarian cancer resistance strain Genes H-ras Proliferation Apoptosis |
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