| 抗氯霉素单链抗体基因的表达及免疫学活性初探 |
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| 引用本文： | 王颖,李涛,周玉,杜承,柳增善. 抗氯霉素单链抗体基因的表达及免疫学活性初探[J]. 中国卫生检验杂志, 2008, 18(5): 769-772 |
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| 作者姓名： | 王颖 李涛 周玉 杜承 柳增善 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学教育部重点实验室人兽共患病所,长春,130062;黑龙江八一农垦大学食品学院,黑龙江大庆,136319
2. 吉林大学教育部重点实验室人兽共患病所,长春,130062 |
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| 摘 要： | 目的：构建和原核表达抗氯霉素（CAP）的单链抗体基因,并进行免疫学活性的初步测定。方法：通过柔性连接肽（G4S）3,将成功克隆出的氯霉素单抗4B12的重、轻链可变区基因（VH和VL）组装成CAP-SCFV,并在5＇和3＇引入相应的酶切位点,克隆到pET-22b（＋）后转化入E.coliBL21的工程菌;分别在25℃和37℃诱导表达,SDS-PAGE电泳和间接ELISA分析表达的目的蛋白和纯化后的免疫活性。结果：经酶切鉴定,DNA测序分析和NCBI比较,证明基因构建正确,轻链为鼠源κ链,所得单链抗体具有功能性鼠抗体可变区基因的特征;SDS-PAGE和间接ELISA分析检测表达产物,目的蛋白为24ku,纯化后的蛋白在64000倍稀释时免疫学活性良好。结论：在成功的原核表达了CAP-SCFV的同时保证了CAP单链抗体的抗原表位暴露正常,为药物残留的下步检测方法建立奠定了基础。
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| 关 键 词： | 氯霉素 单链抗体 分泌表达 药物残留 抗氯霉素 单链抗体 抗体基因 表达 免疫学 免疫活性 gene ScFv molecule secretory expression Construction 检测方法 药物残留 暴露 抗原表位 稀释 分析检测 特征 鼠抗体可变区基因 功能性 |
| 文章编号： | 1004-8685(2008)05-0769-04 |
| 修稿时间： | 2007-11-17 |
Construction and secretory expression in of anti-chloramphenicol molecule ScFv gene E. coli |
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| Wang Ying,Li Tao,Zhou Yu,Du Cheng,Liu Zeng-shan. Construction and secretory expression in of anti-chloramphenicol molecule ScFv gene E. coli[J]. Chinses Journal of Health Laboratory Technology, 2008, 18(5): 769-772 |
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| Authors: | Wang Ying Li Tao Zhou Yu Du Cheng Liu Zeng-shan |
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