| EEF1A2嵌合型重组腺病毒载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 曹海霞,诸琦,章永平,黄佳,张愫,姚玮艳.EEF1A2嵌合型重组腺病毒载体的构建及鉴定[J].实用医学杂志,2009,25(2):174-176. |
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| 作者姓名： | 曹海霞 诸琦 章永平 黄佳 张愫 姚玮艳 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科,200025 |
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| 摘 要： | 目的:克隆人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)基因全长,构建其重组腺病毒载体。方法:应用RT-PCR方法从人胰腺癌组织中扩增人EEF1A2基因全长,经T-A克隆后,亚克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建穿梭质粒pDC316-EEF1A2。利用同源重组的方法将腺病毒骨架质粒pBHG35和穿梭质粒pDC316-EEF1A2共转染293细胞,获得腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2,经过在293细胞中包装和扩增之后,获得高滴度的腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2。PCR、WesternBlot检测EEF1A2基因的表达。结果:用RT-PCR方法,从人胰腺癌组织中扩增出1400bp的cDNA片段,经测序证实为人EEF1A2基因。构建及包装出高滴度的重组腺病毒载体Ad5/F35-EEF1A2。结论:成功地克隆了人EEF1A2基因全长,并构建其表达的重组腺病毒载体,为进一步研究人EEF1A2基因在相关疾病中的作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 腺病毒科 EEF1A2 腺病毒载体 基因克隆 |
| 收稿时间： | 2008-6-13 |
Construction and identification of human chimeric recombinant adenovirus with EEF1A2 gene |
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| CAO Hai-xia,ZHU Qi,ZHANG Yong-ping,HUANG Jia,ZHANG Su,YAO Wei-yan.Construction and identification of human chimeric recombinant adenovirus with EEF1A2 gene[J].The Journal of Practical Medicine,2009,25(2):174-176. |
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| Authors: | CAO Hai-xia ZHU Qi ZHANG Yong-ping HUANG Jia ZHANG Su YAO Wei-yan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | EEF1A2 |
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